| 查看: 1129 | 回复: 12 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
s蛋白纯化
|
|||
| 镍柱纯化蛋白，杂蛋白会不会比目的蛋白与镍柱的结合更牢固？谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有90人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
10楼2011-07-22 17:19:29
★ ★ ★ ★ ★
wsz2056(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+4): 鼓励发帖交流。 2011-07-21 20:29:38
wsz2056(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+4): 鼓励发帖交流。 2011-07-21 20:29:38
|
先简单介绍下NI柱纯化蛋白的原理吧。NI柱纯化依据的是组氨酸能与多种过渡金属离子Ni2+，Co2+等发生特殊的相互作用，因此可以把富含这类氨基酸的蛋白质吸附，从而达到分离的目的。镍离子有六个螯合价数，除掉和柱子配基螯合掉的价数，剩余的就是可以和蛋白中组氨酸螯合掉的价数。 通常我们在目的蛋白上会融合6个组氨酸，只要这六个组氨酸的位点在蛋白质表面而不是被包在构象内部，就可以在合适的条件下挂在柱子上，再通过一定浓度的咪唑洗脱。杂蛋白中一般不会有如此集中的组氨酸数目，所以即使有一两个组氨酸使得杂蛋白挂在柱子上，也容易在低浓度咪唑的时候就先被洗脱下来。当然，也没有人能保证不会有一些特殊的杂蛋白，其组氨酸数目更多更集中，就会比目的蛋白结合的还要牢固。但是通过梯度洗脱，应该也能一定程度上和目的蛋白分离。 |
2楼2011-07-21 19:07:00
3楼2011-07-21 19:11:33
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +248 - MolEPI: 46
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19841
- 帖子: 6622
- 在线: 2794.2小时
- 虫号: 856414
4楼2011-07-21 19:33:54