Originally posted by anlewo7777 at 2011-07-21 10:51:17:
普通的Taq酶只有3’到5‘外切活性和5’→3的聚合酶活性
3’到5‘外切活性是指从3‘端往5’端一个一个切除核苷酸的活性，所以普通Taq酶不会破坏你的5‘端，
貌似化学合成的引物可以在5’端加保护基团，你咨询一下

Originally posted by 西瓜 at 2011-07-21 12:01:00:
普通Taq没有3’到5‘外切活性吧？3‘到5’外切活性是Pfu等高保真酶才有的，是这些酶校正能力的来源。Taq没有，而且扩增后会在3‘端加A，可以用来做TA克隆。Pfu等酶扩增的3’端没有A，因为被酶的3‘到5’外切活 ...

Originally posted by anlewo7777 at 2011-07-21 10:51:17:
普通的Taq酶只有3’到5‘外切活性和5’→3的聚合酶活性
3’到5‘外切活性是指从3‘端往5’端一个一个切除核苷酸的活性，所以普通Taq酶不会破坏你的5‘端，
貌似化学合成的引物可以在5’端加保护基团，你咨询一下

Originally posted by anlewo7777 at 2011-07-21 22:06:19:
不好意思，弄混了，干扰你判断了。
只有有纠错能力（或叫保真能力）的酶才3‘→5’外切活性。
不过需要提醒你的是，你的引物的茎环部分也是会被配对碱基，合成双链的。

Originally posted by anlewo7777 at 2011-07-23 21:30:22:
我的理解是，即使是茎环部分可以自己形成双链，但是，存在一个两种状态的比例（单链状态和茎环状态），单链状态的会配对合成双链没有疑问，但是残余的引物还是有会从茎环状态转变过来成为单链，就像化学平衡一样， ...