24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 3747  |  回复: 11
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

mamjun

金虫 (小有名气)

[求助] 图例请教聚合酶(Taq酶)外切和内切具体怎么起作用的,急!

有一个茎环状引物,其与模板结合的图形我大致画成这个样子:

(模板)   5’******************************************3‘
                                                                  3’ ******************======)
                                                                                                        5‘======)
                                                                                                    (茎环引物)

说明:引物一部分和模板退火结合,右边的另一部分自己形成茎环结构

我想问得问题是:如果PCR扩增的时候,Taq酶会吧引物5‘端的茎环结构给切掉吗,普通的Taq没有3’到5‘外切活性吧?
那能切除茎环结构的是3’到5‘外切活性,还是5’→3‘外切活性啊?所以说事我搞不明白5’→3’和3‘→5’外切究竟是怎么回事,怎么具体起作用的,谢谢!!

追问:如果不想茎环结构被某种外切活性给切除掉,需要在5‘端添加修饰基团的话,添加什么修饰呢?

[ Last edited by mamjun on 2011-7-21 at 08:21 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)

dhd997: 奖励了,呵呵,你也要申请专家?已经反馈给区长了 2011-07-21 15:25:56
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-07-21 12:01:00:
普通Taq没有3’到5‘外切活性吧?3‘到5’外切活性是Pfu等高保真酶才有的,是这些酶校正能力的来源。Taq没有,而且扩增后会在3‘端加A,可以用来做TA克隆。Pfu等酶扩增的3’端没有A,因为被酶的3‘到5’外切活 ...

正解,奖励EPI
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-07-21 14:26:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mamjun 的主题更新
信息提示
请填处理意见