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一望晴空

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么我的烟粉虱p450酶没有活性？

我取烟粉虱个体若干，研磨离心两次之后，隔一天再拿到别人的实验室高速离心机10万g离心一个小时，取沉淀微粒体作为酶源，用7-乙氧基香豆素做底物，荧光检测了酶的活性，结果对照和实验组的产物一样多，很郁闷啊。实验过程中酶在25度最多暴露2个小时左右，难道就这么失活了，还是别的方面的问题，请各位大侠帮忙啊，不胜感激。
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1楼 2011-07-19 13:28:00
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myjoe00

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-21 13:49:47
这个酶活性不好测，即使跟对照数值不同也不一定就是P450的活性数值
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5楼2011-07-26 17:05:17
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viridwind

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-21 13:49:18
海报楼那。。一般情况下，测酶活性，尤其像这种的，，都放在冰箱里面啊，，现做现那，，，建议你再试一试
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这社会，累算个球！
2楼2011-07-19 17:24:35
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liuxn0103

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-21 13:49:28
这个是不好测定，一定动作快，因为它太容易失活，还有一定要搞清楚制约反应的因素，降低对照的荧光值（也就是本底），这样会做好的。
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Easiersaidthandone
3楼2011-07-20 14:48:59
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343815523

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
木虫/panda(金币+1): 代楼主给应助者评分 2011-08-21 13:49:38
测酶最好是快，提取好后应立即测定活性。而且在提取过程中要注意温度，研磨时温度过高酶就会失活。
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4楼2011-07-23 19:03:56
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