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[求助]
是否引物发生错配
用一对A的特异引物对作为阴性的B扩增,竟也出现目的条带,不同实验者的结果条带亮度有明显差异,且重复性不是太好。本人对引物设计方面不是太了解,所以能否请大家帮忙看看到底是啥情况呢。将这对引物与B的标准序列做了比较如下,前端引物相关性似乎不大:
P1
![]()
P2-RC
![]()
另:退火温度为63度,提高温度貌似可以排除干扰。就以上比较而言,是否该对引物对B较易发生非特异扩增?
[ Last edited by lhm_hnyj on 2011-7-19 at 10:06 ] |
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