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lhm_hnyj金虫 (小有名气)
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是否引物发生错配
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用一对A的特异引物对作为阴性的B扩增，竟也出现目的条带，不同实验者的结果条带亮度有明显差异，且重复性不是太好。本人对引物设计方面不是太了解，所以能否请大家帮忙看看到底是啥情况呢。将这对引物与B的标准序列做了比较如下，前端引物相关性似乎不大： P1  P2-RC  另：退火温度为63度，提高温度貌似可以排除干扰。就以上比较而言，是否该对引物对B较易发生非特异扩增？ [ Last edited by lhm_hnyj on 2011-7-19 at 10:06 ] |
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