24小时热门版块排行榜    

查看: 1909  |  回复: 9
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

weekends

木虫 (小有名气)

[求助] 引物的片段怎么算?急!!!

实验中遇到的困难,我通过常规的方法blast不出来,提示“Please correct the following errors: Specified left primer exceeds built-in maximum of 36.”不知什么原因,请高手指点,或者帮我弄一下,最好的教我如何做,让小生学习学习!非常感谢啦!
目的基因        引物序列       
sh1上游:        GATCCGGATTGTCATGTGACTATAAATTCAAGAGATTTATAGTCACATGACAATCCTTTTTTA       
sh1下游:        AGCTTAAAAAAGGATTGTCATGTGACTATAAATCTCTTGAATTTATAGTCACATGACAATCCG       
预计片段大小(bp)?

sh2上游:GAT CCC GAC AGT GCA AAT ACG ACA AAT TCA AGA GAT TTG TCG TAT TTG CAC TGT CGT TTT TTA       
sh2下游:AGC TTA AAA AAC GAC AGT GCA AAT ACG ACA AAT CTC TTG AAT TTG TCG TAT TTG CAC TGT CGG       
预计片段大小(bp)?

sh3上游:GAT CCG ATC CGA CGT CTA CAG CTA TAT TCA AGA GAT ATA GCT GTA GAC GTC GGA TCT TTT TTA       
sh3下游:AGC TTA AAA AAG ATC CGA CGT CTA CAG CTA TAT CTC TTG AAT ATA GCT GTA GAC GTC GGA TCG       
预计片段大小(bp)?

shNC上游:GAT CCT TCT CCG AAC GTG TCA CGT TCT TCA AGA GAG AAC GTG ACA CGT TCG GAG AAT TTT TTA       
shNC下游:AGC TTA AAA AAT TCT CCG AAC GTG TCA CGT TCT CTC TTG AAG AAC GTG ACA CGT TCG GAG A AG       
预计片段大小(bp)?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-07-19 07:43:08:
但是没搞明白楼主的引物为什么都这么长(63个碱基)!

莫非是Overlap PCR?
9楼2011-07-19 16:30:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 2011-07-19 08:00:59
抛砖引玉
Specified left primer exceeds built-in maximum of 36
这句话大概是说,指定的引物超出了内置的36个碱基最大值。

你是用软件Blast吗?修改一下“内置36碱基最大值”参数,或者将引物变短试试。
2楼2011-07-18 21:21:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weekends

木虫 (小有名气)

“修改一下“内置36碱基最大值”参数,或者将引物变短试试”
怎么弄还是不会!高手能帮帮我吗?
3楼2011-07-18 21:34:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by weekends at 2011-07-18 20:23:34:
实验中遇到的困难,我通过常规的方法blast不出来,提示“Please correct the following errors: Specified left primer exceeds built-in maximum of 36.”不知什么原因,请高手指点,或者帮我弄一下,最好的教我 ...

四个预计片段大小都是67bp。
4楼2011-07-18 21:47:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +6 SUICHILD 2026-03-12 6/300 2026-03-17 09:24 by 雾散后相遇lc
[考研] 环境工程调剂 +6 大可digkids 2026-03-16 6/300 2026-03-16 17:16 by barlinike
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 材料与化工专硕调剂 +3 heming3743 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:05 by peike
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 26考研求调剂 +5 丶宏Sir 2026-03-13 5/250 2026-03-13 13:05 by JourneyLucky
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 283求调剂,材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
信息提示
请填处理意见