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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表达载体构建的相关问题
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friya0910

新虫 (正式写手)

[求助] 表达载体构建的相关问题

现在要构建表达载体，有一些问题不是很明确，希望懂得的不吝赐教啊！
首先是双酶切表达载体和带有目的片段的T载体，一般都切多少时间啊？我看有说切过夜的，也有切几个小时的！切完以后大家都从哪些方面确定酶切完全不完全呢？
其次是连接以后除了直接转化以外，还有什么方法确定是否连接上了呢？
本人新手一个，对于这方面不是很了解，希望各位帮帮忙！
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1楼 2011-07-18 15:05:41
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yrzhao08

铁虫 (初入文坛)
要想缩短双酶切的时间可以用fermentas的快速内切酶，很好用一般30分钟之内就可以酶切完全。我们实验室都是用这个，很好用，大大缩短了时间！
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12楼2011-07-21 11:43:14
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