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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 跑电泳的时候恒压和横流有什么区别？转膜的时候呢？
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xin1284

银虫 (初入文坛)

[求助] 跑电泳的时候恒压和横流有什么区别？转膜的时候呢？

请问跑电泳的时候恒压和横流有什么区别？
转膜的时候恒压和横流有什么区别？
另外做44KD的蛋白质大概需要转膜几小时？

谢谢大家了
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1楼 2011-07-17 08:31:57
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

无多大区别 看个人习惯，恒流时，电压逐步增大，恒压时，电流逐步减小，
我这里习惯恒压跑，转膜也是恒压，我用PVDF膜，25,44,3,88Kd 100v 70min 就很好。
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6楼2011-07-18 07:57:09
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 貌似转膜时间有点长 2011-07-17 20:29:57
xin1284(金币+2): 谢谢 2011-07-18 17:00:04
电泳是恒压
转膜是恒流

44kd的 2-2.5h就行了
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2楼2011-07-17 08:52:22
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xin1284

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by linyingjia at 2011-07-17 08:52:22:
电泳是恒压
转膜是恒流

44kd的 2-2.5h就行了

我们实验室电泳用的恒流
转膜用的恒压，所以我才不解
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3楼2011-07-17 08:58:45
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lstt09nk

铁杆木虫 (职业作家)

小堂

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2): 你得告诉人家你的电流多大~电流小了电压是升不上去的 2011-07-18 12:25:18
xin1284(金币+8): 我用湿转，110V，2h，PVDF膜 2011-07-18 17:00:55
我的蛋白110kD，一般湿转，90V,120min,
你的这个要是湿转的话，80V,2h,足以，
要是想确定最佳转膜时间的话，可以将转完膜后的蛋白胶再重新染色，看看你的蛋白是否还在上面，一般蛋白都不会转的很完全，不过，做WB鉴定足以
赞一下(1人) 回复此楼
坚持能无数次改变人生的风景，因为只要路是对的，就不怕远~~~
5楼2011-07-17 20:35:35
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