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xin1284

银虫 (初入文坛)

[求助] 跑电泳的时候恒压和横流有什么区别?转膜的时候呢?

请问跑电泳的时候恒压和横流有什么区别?
转膜的时候恒压和横流有什么区别?
另外做44KD的蛋白质大概需要转膜几小时?

谢谢大家了
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lstt09nk

铁杆木虫 (职业作家)

小堂

【答案】应助回帖

★ ★
silicare(金币+2): 你得告诉人家你的电流多大~电流小了电压是升不上去的 2011-07-18 12:25:18
xin1284(金币+8): 我用湿转,110V,2h,PVDF膜 2011-07-18 17:00:55
我的蛋白110kD,一般湿转,90V,120min,
你的这个要是湿转的话,80V,2h,足以,
要是想确定最佳转膜时间的话,可以将转完膜后的蛋白胶再重新染色,看看你的蛋白是否还在上面,一般蛋白都不会转的很完全,不过,做WB鉴定足以
坚持能无数次改变人生的风景,因为只要路是对的,就不怕远~~~
5楼2011-07-17 20:35:35
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 貌似转膜时间有点长 2011-07-17 20:29:57
xin1284(金币+2): 谢谢 2011-07-18 17:00:04
电泳是恒压
转膜是恒流

44kd的 2-2.5h就行了
2楼2011-07-17 08:52:22
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xin1284

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by linyingjia at 2011-07-17 08:52:22:
电泳是恒压
转膜是恒流

44kd的 2-2.5h就行了

我们实验室电泳用的恒流
转膜用的恒压,所以我才不解
3楼2011-07-17 08:58:45
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

无多大区别 看个人习惯,恒流时,电压逐步增大,恒压时,电流逐步减小,
我这里习惯恒压跑,转膜也是恒压,我用PVDF膜,25,44,3,88Kd 100v 70min 就很好。
6楼2011-07-18 07:57:09
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