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mengfei2050

铜虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE 我的样品没有跑出条带,请教高手!谢谢!

我从sigma买的脂肪酶pfl,昨天做了SDS-PAGE,电泳的结果是marker和其他人的发酵液提取的蛋白都有条带,就我的样一条也没跑出来。
我对样品的处理方法是:
用缓冲溶液配制酶的溶液,酶浓度0.001--5 mg/mL一共五六个浓度。
上样的时候直接10uL酶溶液加10uL巯基乙醇混合。
求原因。
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comeon
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tomorrowhl

新虫 (初入文坛)

我用细菌胞外产物跑PAGE,要不是没有条带,要不是模糊的条带,maker和样品的泳道挨着就会被及变形,样品的泳道很宽,差不多是两个用到那么款。用考马斯亮蓝测定蛋白质含量为1.78mg/ml。在电泳时会看到有黄色物质从样品泳道中析出。请各位高手指点迷津,小女子不胜感激啊!!!!
我的浓缩胶浓度为12,实验室其他人和我同时跑都能跑出清晰的条带
6楼2012-05-15 16:04:15
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