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churchill87426

木虫 (正式写手)

[交流] 近期实验小霉...小霉总结已有9人参与

1、要做一个酶的inhibitor screening实验,买的Sigma酶网站上标的5000+RMB 50mg,结果送来只有50ug, 后联系Sigma,被告知网站错了...严重延误俺的实验进度。该实验一系列所购试剂价值1W左右,最后全部退货。



2、国产试剂不可信,以前用康为做RT-PCR的试剂盒,后来换了个批号的,同牌子的,无法重现实验。排除各个原因最终发现是试剂盒的问题。最后换Takara RT -PCR试剂盒,1次即搞定。耽误约1个月的时间



3、在鼎国合成引物,PCR,TA克隆,测序发现在引物区就少了一个A碱基,但又不能肯定是引物的错。因为PCR过程Taq polymerase在每次循环中产生的移码突变率为1/30000,碱基替换率为1/8000,但这个突变发生在引物区的概率应该会更低...Hence, 随不敢说肯定是引物的错,但这个概率应该和[1-中彩票概率]差不多了。PS:有兴趣的理性派可以算一下这个概率...
俺又新合成了引物,希望下周赶进度,move move!!!



再次噩耗 :等了一天引物,下午供应商来了告诉我忘带了...伤不起啊伤不起...最近肿么那么被啊......



Summary

实验设计很重要,Hard working也很重要,但高质量的试剂,试剂供应商更重要!!!


BTW 俺不是给厂家打广告的...

[ Last edited by churchill87426 on 2011-7-4 at 16:40 ]
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jeavy2008

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
试剂是很重要,我用百泰克的taq酶 做出假阳性了,测序一看大肠杆菌里的,直接让人无语。
6楼2011-07-05 13:16:30
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