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tuzhijiang

银虫 (初入文坛)

[求助] 阿霉素的标准曲线拟合

我最近做阿霉素的体外释放,今天刚刚用紫外吸收拟合了一条标准曲线。
拟合后的r=0.995,不知道可不可以用,我看很多人说至少要在三个9甚至是4个9以上才可以。还有Ab吸光度的问题,我配置的母液最大的吸收度也只有0.2,其他的就更小了,书上说吸光度在0.3-0.7之间才有可信度。另外还有阿霉素吸光度的取点都是在480nm处吗,至少我看大部分文献都是这么说的,也有少部分用其他的波长的。
希望大家能给点意见,谢谢了`
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duruo

荣誉版主 (文坛精英)

孩儿她爹

优秀超版优秀版主优秀区长

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-26 10:16:30
八戒的小弟: 金币+8, BM-EPI+1, 杜超在生物材料版很积极呀,我看到了就奖励下 2012-04-26 10:27:22
解释下:
1、R值问题,一般要求R值越接近1越好,一般要求至少3个9以上。否则以后申报会很难。至于阿霉素一般达到4个9没有问题。如果你没有达到,一般是选择浓度范围有问题,当然也可能是仪器原因。

2、习惯度问题。0.3-0.7(或0.8)是紫外最为灵敏的区域,但并不是说超过这个范围就不能使用。但一般范围选择在0.1-1(或稍大一些)以内,超过这个范围误差就会较大了。

3、选择测量波长,一般选择480nm是因为这里吸收比较大,测量精确度高;但如果你体系中其他物质在这里有干扰,当然可以选择其他波长测定。
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
2楼2012-04-26 10:08:21
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-28 16:37:59
如果你的标准曲线大于4个9,你基本上要悲剧了,审稿人不信啊
3楼2012-04-28 16:32:51
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖


mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-28 16:39:00
书上说吸光度在0.3-0.7之间才有可信度,这是因为仪器本身的特点决定的,高于或低于这个范围,仪器本身的误差干扰都会比较大
4楼2012-04-28 16:33:58
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hydrogel

禁虫 (著名写手)


感谢参与,应助指数 +1
lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-04-30 10:51:12
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5楼2012-04-30 02:01:33
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liuanan

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lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-05-02 09:00:13
引用回帖:
5楼: Originally posted by hydrogel at 2012-04-30 02:01:33:
那哟看什么紫外仪器,0.3-0.7是以前的老仪器,其实现在的紫外仪器完全不是那个范围了。

你不“理解”仪器,我用的是08年进口的国际上常用的一个型号。仪器标明的参数不是那么靠谱。
6楼2012-04-30 18:28:41
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hydrogel

禁虫 (著名写手)

markar: 应助指数-1, 这也能算应助? 2012-05-01 10:12:56
本帖内容被屏蔽

7楼2012-05-01 00:47:54
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liuanan

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lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-05-02 09:00:22
引用回帖:
7楼: Originally posted by hydrogel at 2012-05-01 00:47:54:
呵呵,你牛,你更理解~~~

好吧,就给你多解释一点吧,免得你说我不够客气。
仪器参数的评定是厂家在仪器出厂时进行校订后测量的结果。这里面涉及到两个问题:1.设备参数是刚刚校正后的数据,而仪器在长期使用过程中,内部的精密元件不可避免的会缓慢发生漂移,这个微小的误差在较大吸光度条件下是会被掩盖看不出来的。但是,比如仪器参数声称能够精确到0.0001,操作者连0.001都无法测量准确,因为这个吸光度太小,仪器的漂移往往已经超出这个值了。2.仪器长期使用过程中的维护不善,说实话,中国的仪器很少有专业的实验员进行良好的维护,有机溶剂的腐蚀啥的多了去了,越是精密的仪器,越经不起折腾。仪器的测量下限根本不可靠。
      上面说的是仪器,再说说测试本身的特点,测试吸收的时候,溶液能不能配准确,浓度太小的溶液,说实话,很难配的准确。
      还有一个再吸收的问题,那个现象是越稀的溶液再吸收现象影响越大,浓度小的溶液测出来的吸收会很诡异,不信你可以多找几个染料分子试试看。
8楼2012-05-01 12:06:23
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hydrogel

禁虫 (著名写手)


lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-05-02 09:00:27
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9楼2012-05-01 18:39:05
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liuanan

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lixiangde: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-05-02 09:00:33
引用回帖:
9楼: Originally posted by hydrogel at 2012-05-01 18:39:05:
全部是废话,自己不会操作仪器和配溶液也能怪仪器本身??

扣大帽子而不是有理有据的反驳,这不是具有科学素养的表现哦。
10楼2012-05-01 22:50:31
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