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生科yolanda

铁虫 (小有名气)

[求助] 本人菜鸟，想问下高效液相色谱的若干问题

哎，我们现在的实验需要分析一些有机酸，但是不知道如何去做。

这是我们需要分离的酸类：乳酸、柠檬酸、琥珀酸，另一组是苹果酸、莽草酸。

现在需要购买标样，配置混标，那么在哪个网站上购买？如何购买？需要买的量是多少？我们一共有192个样品需要测，买回来之后的配置又要怎么配？是多少浓度的，还有，浓度是单个标样的浓度还是总的浓度呢？

谢谢大家的回答，我实在是不清楚这些。。。。。
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1楼2011-07-02 14:57:47
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冰片

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

生科yolanda(金币+2): 嗯 谢谢 终于搞明白了 2011-07-02 21:43:37
我觉得看起来，你对分析不是很熟悉，如果是这样，你不如和导师说委托分析。看你的条件是还可以的，也注意到了和有机酸的pka结合问题，你先把标准品从sigma或者是其他可靠来源处购买来，先做做看，我是担心，有些酸的极性过大，反向有可能保留不住。至于含量的计算，我的建议是配混标，溶剂用水就可以了，但是计算和测定时一个一个看
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沉舟侧畔千帆过、病树前头万木春
4楼2011-07-02 20:34:22
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冰片

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-07-24 21:47:52
如果只是需要标准品的话，当然还是sigma来的更稳妥点。但是有一点疑惑，我以前做过有机酸的分析，一直用的GC-MS，如果想使用LC的话，那么column呢？建议可以试试C4，正向柱以及hilic。
   如果确定化合物之间没有DDI，应该还是混标比较好，单标计算，建议加一个内标，因为化合物太多，可能会有响应干扰和污染等问题
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沉舟侧畔千帆过、病树前头万木春
2楼2011-07-02 17:54:57
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生科yolanda

铁虫 (小有名气)
你好，是这样的。我只要在做植物的生理，现在测根部的这些酸的含量，原来测的是其他物种的，色谱条件是：柱子C18（4.6*150mm），流动相HClO4（ph=2.5），流速0.5ml/min，检测波长214mm，带宽4nm，柱温30°，进样量是20ul

你说的我不是很明白，请问你有QQ吗？方便加一下吗？
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3楼2011-07-02 19:39:17
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tingl0087

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 生科yolanda at 2011-07-02 14:57:47:
哎，我们现在的实验需要分析一些有机酸，但是不知道如何去做。

这是我们需要分离的酸类：乳酸、柠檬酸、琥珀酸，另一组是苹果酸、莽草酸。

现在需要购买标样，配置混标，那么在哪个网站上购买？如何购买？需 ...

你好，我现在是做代谢的有机酸分析，主要做发酵液与细胞内草酰乙酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸的定量定性检测，物质组分比较复杂，考虑用GC-MS可以吗？有什么要注意的？
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5楼2011-07-22 16:53:29
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