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生科yolanda

铁虫 (小有名气)

[求助] 本人菜鸟,想问下高效液相色谱的若干问题

哎,我们现在的实验需要分析一些有机酸,但是不知道如何去做。

这是我们需要分离的酸类:乳酸、柠檬酸、琥珀酸,另一组是苹果酸、莽草酸。

现在需要购买标样,配置混标,那么在哪个网站上购买?如何购买?需要买的量是多少?我们一共有192个样品需要测,买回来之后的配置又要怎么配?是多少浓度的,还有,浓度是单个标样的浓度还是总的浓度呢?

谢谢大家的回答,我实在是不清楚这些。。。。。
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生科yolanda

铁虫 (小有名气)

你好,是这样的。我只要在做植物的生理,现在测根部的这些酸的含量,原来测的是其他物种的,色谱条件是:柱子C18(4.6*150mm),流动相HClO4(ph=2.5),流速0.5ml/min,检测波长214mm,带宽4nm,柱温30°,进样量是20ul

你说的我不是很明白,请问你有QQ吗?方便加一下吗?
3楼2011-07-02 19:39:17
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冰片

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖


opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-07-24 21:47:52
如果只是需要标准品的话,当然还是sigma来的更稳妥点。但是有一点疑惑,我以前做过有机酸的分析,一直用的GC-MS,如果想使用LC的话,那么column呢?建议可以试试C4,正向柱以及hilic。
   如果确定化合物之间没有DDI,应该还是混标比较好,单标计算,建议加一个内标,因为化合物太多,可能会有响应干扰和污染等问题
沉舟侧畔千帆过、病树前头万木春
2楼2011-07-02 17:54:57
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冰片

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

生科yolanda(金币+2): 嗯 谢谢 终于搞明白了 2011-07-02 21:43:37
我觉得看起来,你对分析不是很熟悉,如果是这样,你不如和导师说委托分析。看你的条件是还可以的,也注意到了和有机酸的pka结合问题,你先把标准品从sigma或者是其他可靠来源处购买来,先做做看,我是担心,有些酸的极性过大,反向有可能保留不住。至于含量的计算,我的建议是配混标,溶剂用水就可以了,但是计算和测定时一个一个看
沉舟侧畔千帆过、病树前头万木春
4楼2011-07-02 20:34:22
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tingl0087

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 生科yolanda at 2011-07-02 14:57:47:
哎,我们现在的实验需要分析一些有机酸,但是不知道如何去做。

这是我们需要分离的酸类:乳酸、柠檬酸、琥珀酸,另一组是苹果酸、莽草酸。

现在需要购买标样,配置混标,那么在哪个网站上购买?如何购买?需 ...

你好,我现在是做代谢的有机酸分析,主要做发酵液与细胞内草酰乙酸、苹果酸、富马酸、琥珀酸的定量定性检测,物质组分比较复杂,考虑用GC-MS可以吗?有什么要注意的?
5楼2011-07-22 16:53:29
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