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jinpeng_6118木虫 (正式写手)
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BL21(DE3)表达脂肪酶重组质粒,将菌体颜色偏白是是怎么回事 已有4人参与
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| 最近构建了两个脂肪酶重组质粒,分别转入BL21(DE3)中表达,诱导前菌体颜色一样,加入终浓度0.1mM IPTG 15℃诱导24h后,离心菌体,其中一个的菌体颜色为正常的大肠杆菌色(颜色略偏淡黄些),而另一个菌体就偏白色了,破碎后不是那种呈澄清状,而是有点呈乳白色,离心后沉淀比另一个多。这个质粒已经这样摇过好几次了,结果都是一样,这次是重新连接后再转了一次新买的BL21。两只里同源性很高,跑过蛋白电泳,可溶性蛋白量差不多的。另外也排除染菌的可能了。请各位高手分析下什么原因。谢谢 |
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bmby
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17楼2011-12-31 12:28:52
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