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zhinuo1001

银虫 (小有名气)

[求助] 求解:qPCR & RT-qPCR 的区别

近日 在看做荧光定量的相关文献
遇到一个概念上的问题
求各位高人指点下啊

qPCR:the abbreviation for quantitative real-time PCR
RT-qPCR: the abbreviation for  reverse transcript-qPCR

可RT-qPCR这个跟qPCR有什么区别呢?
qPCR这个是不是我们常说的RT-PCR?
qPCR不是一样要反转才能做的嘛  还是直接用DNA模板做的?
还是RT-qPCR才是我们常说的RT-PCR?

看得我很懵啊
For HELP~~~

先谢谢啦~~~
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huan-liu

新虫 (初入文坛)

以前搞不清楚两个概念,现在清楚了,谢谢。
9楼2013-03-25 18:52:21
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查看全部 11 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

zhinuo1001(金币+5): good~ 2011-06-22 22:36:27
zhinuo1001(金币+2): 还有两金币……都发完吧 2011-06-22 22:41:23
虽然Real-time PCR(实时荧光定量PCR)和Reverse transcription PCR(反转录PCR)看起来都可以缩写为RT-PCR,但是,国际上的约定俗成的是:RT-PCR特指反转录PCR,而Real-time PCR一般缩写为qPCR(quantitative real-time PCR)。

更正楼主的观点:qPCR不一定与反转录相关,除了可以用cDNA作为模板,也可以用基因组DNA等作为模板。而反转录PCR也不一定非要与荧光定量相关,从mRNA中反转录得到cDNA,然后PCR扩增出目的基因,这也是反转录PCR。

综上,那RT-qPCR(也有人写成qRT-PCR)就很好理解了,就是结合了荧光定量技术的反转录PCR:先从RNA反转录得到cDNA(RT),然后用Real-time PCR进行定量分析(qPCR)。

有兴趣的话可以看看维基百科:http://en.wikipedia.org/wiki/Rev ... rase_chain_reaction
Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) is a variant of polymerase chain reaction (PCR), a laboratory technique commonly used in molecular biology to generate many copies of a DNA sequence, a process termed "amplification". In RT-PCR, however, an RNA strand is first reverse transcribed into its DNA complement (complementary DNA, or cDNA) using the enzyme reverse transcriptase, and the resulting cDNA is amplified using traditional PCR or real-time PCR. Reverse transcription PCR is not to be confused with real-time polymerase chain reaction (Q-PCR/qRT-PCR), which is also sometimes abbreviated as RT-PCR.

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2楼2011-06-22 21:36:26
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caisanrenju

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

zhinuo1001(金币+2): 恩 2011-06-22 22:37:13
zhinuo1001(金币+1): 还剩一个金币…… 2011-06-22 22:41:43
按照你以前的理解是对的,但现在,
RT-PCR被默认为反转录PCR,而实时荧光定量PCR简写为qRT-PCR
3楼2011-06-22 21:37:50
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beautybanana

木虫 (著名写手)


西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-06-23 16:20:16
我坐地板吧~呵呵
qPCR: 就是定量PCR(模板是DNA/RNA)
RT-qPCR:就是通过反转录的定量PCR(模板是cDNA),前者是泛指,后者是特指~
帮助MM消化理解一下~
4楼2011-06-22 23:26:51
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