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小新3858木虫 (正式写手)
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[求助]
为什么考马斯亮蓝染色能看到我要的条带，weston却看不到呢？
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| RT，我每次做电泳都是做两块，一块考马斯亮蓝染色，一块做weston，每次都是考染有条带，weston却看不到，，我做weston做的不多，大侠们帮忙分析一下原因 |
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小新3858
木虫 (正式写手)
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3楼2011-06-22 10:02:43
2楼2011-06-22 09:25:15
zsy1106
金虫 (小有名气)
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）做不出来就有很多可能了：4楼2011-06-22 10:16:29
didillytao
银虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-06-22 17:23:37
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-06-22 17:23:37
| 如果你能确定染出来的条带是你要的话,那么应该是western的转膜,一抗,二抗,ecl中某个出了问题.不知道你们是不是湿转,膜在半干的状态下也能看到蛋白条带,你可以看一看确定有没有蛋白转到膜上,还有就是一抗和二抗的验证,二抗直接滴在膜上加ECL显色就可以验证好不好用,效价怎么样,而一抗的话以前用过吗?显色是没问题的吗?有没有过期之类的,而且ECL底物发光时间是有时限的,有些比较灵敏的ECL发光时间很短,如果动作慢可能荧光就会猝灭了,我觉得原因很多,楼主看一看哪项更有可能,希望能帮到你~~ |
5楼2011-06-22 10:16:36
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