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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 芽孢杆菌中表达外源蛋白
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eveline8608

新虫 (初入文坛)

[求助] 芽孢杆菌中表达外源蛋白

各位大侠，请教个问题，芽孢杆菌中外源表达真核生物基因，已用过几种信号肽，并且也试过融合表达，总是看不到目的蛋白，但是已经过验证基因得到了转录，ELISA确证发酵上清液中没有目的蛋白，接下来我应该怎么着手实验呢？谢谢啦！补充：我的受体菌是野生型的，蛋白酶基因什么的全在。
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1楼 2011-06-21 17:17:09
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

eveline8608(金币+1): 也破过菌体的，但是... 2011-06-22 21:32:00
用的是什么质粒啊？
还有应该看一下沉淀里有没有，是否形成包涵体之类的。枯草对蛋白质空间结构的要求较大肠高。
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微生物发酵
3楼2011-06-22 08:17:32
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
scelab(金币+2): 谢谢交流 2011-06-22 08:26:43
eveline8608(金币+1): 但是我们实验室没有蛋白酶基因缺失突变菌株，对于这个问题很没有办法啊 2011-06-22 21:31:03
受体菌是野生型的话，外源表达的蛋白容易被降解，建议你最好换成蛋白酶基因缺失突变菌株，祝好运！
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2楼2011-06-21 18:34:42
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