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eveline8608

新虫 (初入文坛)

[求助] 芽孢杆菌中表达外源蛋白

各位大侠,请教个问题,芽孢杆菌中外源表达真核生物基因,已用过几种信号肽,并且也试过融合表达,总是看不到目的蛋白,但是已经过验证基因得到了转录,ELISA确证发酵上清液中没有目的蛋白,接下来我应该怎么着手实验呢?谢谢啦!补充:我的受体菌是野生型的,蛋白酶基因什么的全在。
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
scelab(金币+2): 谢谢交流 2011-06-22 08:26:43
eveline8608(金币+1): 但是我们实验室没有蛋白酶基因缺失突变菌株,对于这个问题很没有办法啊 2011-06-22 21:31:03
受体菌是野生型的话,外源表达的蛋白容易被降解,建议你最好换成蛋白酶基因缺失突变菌株,祝好运!
2楼2011-06-21 18:34:42
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

eveline8608(金币+1): 也破过菌体的,但是... 2011-06-22 21:32:00
用的是什么质粒啊?
还有应该看一下沉淀里有没有,是否形成包涵体之类的。枯草对蛋白质空间结构的要求较大肠高。
微生物发酵
3楼2011-06-22 08:17:32
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