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youcai147

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 琼脂糖电泳的做胶问题

在文献上看做琼脂糖胶的时候,加入1%的EB在里面,我有几问题想请教下大家,1%的EB我换成1%SYBR green可以不? 还有,什么时候才能把染色剂加入胶里面,刚煮来的胶是很热的,这样直接加,还是和胶一起煮?
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real-gold

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhoujie833 at 2011-07-01 16:20:13:
我看我师姐那个时候做的时候EB是在跑完板以后用EB染色的 没把EB加入到胶里面  EB有很强的致癌性质  我们现在在尝试用凝胶红来代替EB哦  我记得EB的浓度好像是1g/L

你好,请问凝胶红是什么物质?使用浓度多少?谢谢
4楼2011-07-04 18:37:06
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
youcai147(金币+5): SYBR green加入的量能有具体的吗?10ul DNA +1ul 100X的工作液可以不 2011-06-20 18:59:45
lstt09nk(金币+5): 热心 2011-06-20 21:03:45
silicare(EPI+1): 点染也可以 2011-06-27 17:15:02
如果加EB的话,建议等胶稍冷,但不至于凝固的时候加入(可以用手背触碰,烫但不至于难以忍受的时候就差不多了);并且 EB疑似对人体有害(致癌可能性),所以注意防护。
  SYBR Green的话,建议不要做胶的时候加入,可以等胶跑完的时候,再用浸泡法,把胶浸入SYBR溶液中(50ml足够),但是浓度记不得了,觉得1%有点过高,你查查吧~
2楼2011-06-20 18:16:21
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zhoujie833

木虫 (正式写手)

我看我师姐那个时候做的时候EB是在跑完板以后用EB染色的 没把EB加入到胶里面  EB有很强的致癌性质  我们现在在尝试用凝胶红来代替EB哦  我记得EB的浓度好像是1g/L
时光匆匆如流水,岁月如流不复回
3楼2011-07-01 16:20:13
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uuu555000

捐助贵宾 (正式写手)

我也很想知道  我也要做琼脂糖凝胶电泳
无所谓好或不好,人生一场虚空大梦,韶华白首,不过转瞬,惟有天道恒在,往复循环,不曾更改
5楼2011-07-04 19:27:57
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