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youcai147

铁杆木虫 (著名写手)

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[求助] 琼脂糖电泳的做胶问题

在文献上看做琼脂糖胶的时候，加入1%的EB在里面，我有几问题想请教下大家，1%的EB我换成1%SYBR green可以不？还有，什么时候才能把染色剂加入胶里面，刚煮来的胶是很热的，这样直接加，还是和胶一起煮？

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1楼 2011-06-20 17:55:27

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real-gold

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by zhoujie833 at 2011-07-01 16:20:13:
我看我师姐那个时候做的时候EB是在跑完板以后用EB染色的没把EB加入到胶里面 EB有很强的致癌性质我们现在在尝试用凝胶红来代替EB哦我记得EB的浓度好像是1g/L

你好，请问凝胶红是什么物质？使用浓度多少？谢谢

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4楼2011-07-04 18:37:06

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gaoyang636

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
youcai147(金币+5): SYBR green加入的量能有具体的吗？10ul DNA +1ul 100X的工作液可以不 2011-06-20 18:59:45
lstt09nk(金币+5): 热心 2011-06-20 21:03:45
silicare(EPI+1): 点染也可以 2011-06-27 17:15:02

如果加EB的话，建议等胶稍冷，但不至于凝固的时候加入（可以用手背触碰，烫但不至于难以忍受的时候就差不多了）；并且 EB疑似对人体有害（致癌可能性），所以注意防护。
SYBR Green的话，建议不要做胶的时候加入，可以等胶跑完的时候，再用浸泡法，把胶浸入SYBR溶液中（50ml足够），但是浓度记不得了，觉得1%有点过高，你查查吧～

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2楼2011-06-20 18:16:21

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