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whil86

金虫 (小有名气)


[交流] 蛋白 连接 EDC

我用EDC方法连接BSA和带羧基的纳米离子,但是发现,连接之后,里面变浑浊了,并且离心的时候,发现下面有白色沉淀,这事怎么回事?谁能告诉我啊,谢谢谢

[ Last edited by taozhikai on 2011-6-18 at 12:59 ]
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baitao8888

木虫 (正式写手)


★ ★
whil86(金币+1):谢谢参与
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-06-15 09:58:44
反应产物不溶于水?
2楼2011-06-14 19:52:52
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whil86

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by baitao8888 at 2011-06-14 19:52:52:
反应产物不溶于水?

溶解的,但是跟絮状沉淀差不多。振荡之后还是可以溶解的。目前我还不敢超声,怕把蛋白给超掉了,其实超声应该没有问题吧?
我这个是怎么回事呢?是不是因为蛋白放的太多?还是其他的什么原因呢?
3楼2011-06-15 09:21:10
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baitao8888

木虫 (正式写手)



lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-06-15 16:46:32
whil86(金币+1): 2011-06-18 20:48:21
引用回帖:
Originally posted by whil86 at 2011-06-15 09:21:10:
溶解的,但是跟絮状沉淀差不多。振荡之后还是可以溶解的。目前我还不敢超声,怕把蛋白给超掉了,其实超声应该没有问题吧?
我这个是怎么回事呢?是不是因为蛋白放的太多?还是其他的什么原因呢?

这个我觉得你得自己慢慢试。。。我也不知道你的东西是什么性质,慢慢调吧
4楼2011-06-15 10:35:43
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ashui001

木虫 (著名写手)


★ ★
whil86(金币+1):谢谢参与
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-06-15 16:46:40
白色絮状的东西有可能是BSA本身互相交联产生的团聚物,可以考虑降低EDC的用量,或者BSA的用量
以上只是猜测,仅供参考
5楼2011-06-15 12:24:10
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)



whil86(金币+1):谢谢参与
应该是BSA自身发生交联,你可以先将纳米粒子用EDC进行活化,在介入BSA。至于EDC投料比例
6楼2011-06-17 12:40:17
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whil86

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by baitao8888 at 2011-06-15 10:35:43:
这个我觉得你得自己慢慢试。。。我也不知道你的东西是什么性质,慢慢调吧

是的,但是本来是想连接在纳米粒子上的,没想到,蛋白会发生自连,不知道用什么办法可以控制蛋白自连、
7楼2011-06-18 20:49:29
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whil86

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by zoujie at 2011-06-17 12:40:17:
应该是BSA自身发生交联,你可以先将纳米粒子用EDC进行活化,在介入BSA。至于EDC投料比例

不知道,有没有比较好的投料比?我先在不知道,怎么能减少蛋白的自连。
8楼2011-06-18 20:50:20
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whil86

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by ashui001 at 2011-06-15 12:24:10:
白色絮状的东西有可能是BSA本身互相交联产生的团聚物,可以考虑降低EDC的用量,或者BSA的用量
以上只是猜测,仅供参考

嗯嗯,好的,我现在在摸索最佳连接量,不知道我摸索连接量是不是有实际性的作用。
9楼2011-06-18 20:51:42
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微小瓜虫

新虫 (小有名气)



whil86(金币+1):谢谢参与
貌似BSA的自身交联很不可避免了
10楼2011-10-21 09:41:34
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
投料BSA浓度太高了
已经交联过度了
应该先加EDC和纳米粒子活化
再加少量BSA
11楼2011-10-21 10:43:06
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yangshen1987

新虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
你的EDC是盐酸盐的吗?是哪里买的
12楼2011-10-25 11:34:01
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
这个估计是你的BSA自身发生反应,聚合了
13楼2011-10-27 09:22:16
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)


你做的时候应该控制加入反应物的顺序和量,我觉得首先你应采用EDC活化你的纳米粒子,而后在投入过量的BSA
14楼2011-10-27 09:24:02
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yaiqi-87

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2268104楼: Originally posted by zoujie at 2011-10-27 09:24:02
你做的时候应该控制加入反应物的顺序和量,我觉得首先你应采用EDC活化你的纳米粒子,而后在投入过量的BSA

我做过表面带羧基的磁纳米,EDC活化后,未加入蛋白就出现絮状物了,求教如何解决,谢谢!
15楼2012-12-13 13:45:17
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-12-13 22:29:55
引用回帖:
2464323楼: Originally posted by yaiqi-87 at 2012-12-13 13:45:17
我做过表面带羧基的磁纳米,EDC活化后,未加入蛋白就出现絮状物了,求教如何解决,谢谢!...

应该是你的纳米粒子表面除了羧基还有羟基或者氨基,而发生了那里粒子之间的反应吧。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

16楼2012-12-13 17:23:49
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yaiqi-87

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
引用回帖:
2464406楼: Originally posted by zoujie at 2012-12-13 17:23:49
应该是你的纳米粒子表面除了羧基还有羟基或者氨基,而发生了那里粒子之间的反应吧。...

那对于这种凝絮,有什么解决方法没?
17楼2012-12-13 17:57:31
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shanxiaoyue

铁虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我看文献里要的就是沉淀,离心后把沉淀分散在缓冲溶液中就是探针了,我还做不出沉淀呢
18楼2013-06-04 20:47:10
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