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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 纳米生物材料 » 蛋白 连接 EDC
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whil86

金虫 (小有名气)

[交流] 蛋白 连接 EDC

我用EDC方法连接BSA和带羧基的纳米离子，但是发现，连接之后，里面变浑浊了，并且离心的时候，发现下面有白色沉淀，这事怎么回事？谁能告诉我啊，谢谢谢

[ Last edited by taozhikai on 2011-6-18 at 12:59 ]
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1楼 2011-06-14 17:53:11
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baitao8888

木虫 (正式写手)
★ ★
whil86(金币+1):谢谢参与
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-06-15 09:58:44
反应产物不溶于水？
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2楼2011-06-14 19:52:52
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whil86

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by baitao8888 at 2011-06-14 19:52:52:
反应产物不溶于水？

溶解的，但是跟絮状沉淀差不多。振荡之后还是可以溶解的。目前我还不敢超声，怕把蛋白给超掉了，其实超声应该没有问题吧？
我这个是怎么回事呢？是不是因为蛋白放的太多?还是其他的什么原因呢？
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3楼2011-06-15 09:21:10
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baitao8888

木虫 (正式写手)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-06-15 16:46:32
whil86(金币+1): 2011-06-18 20:48:21
引用回帖:
Originally posted by whil86 at 2011-06-15 09:21:10:
溶解的，但是跟絮状沉淀差不多。振荡之后还是可以溶解的。目前我还不敢超声，怕把蛋白给超掉了，其实超声应该没有问题吧？
我这个是怎么回事呢？是不是因为蛋白放的太多?还是其他的什么原因呢？

这个我觉得你得自己慢慢试。。。我也不知道你的东西是什么性质，慢慢调吧
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-06-15 10:35:43
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ashui001

木虫 (著名写手)
★ ★
whil86(金币+1):谢谢参与
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-06-15 16:46:40
白色絮状的东西有可能是BSA本身互相交联产生的团聚物，可以考虑降低EDC的用量，或者BSA的用量
以上只是猜测，仅供参考
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5楼2011-06-15 12:24:10
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)
★
whil86(金币+1):谢谢参与
应该是BSA自身发生交联，你可以先将纳米粒子用EDC进行活化，在介入BSA。至于EDC投料比例
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6楼2011-06-17 12:40:17
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whil86

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by baitao8888 at 2011-06-15 10:35:43:
这个我觉得你得自己慢慢试。。。我也不知道你的东西是什么性质，慢慢调吧

是的，但是本来是想连接在纳米粒子上的，没想到，蛋白会发生自连，不知道用什么办法可以控制蛋白自连、
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7楼2011-06-18 20:49:29
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whil86

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zoujie at 2011-06-17 12:40:17:
应该是BSA自身发生交联，你可以先将纳米粒子用EDC进行活化，在介入BSA。至于EDC投料比例

不知道，有没有比较好的投料比？我先在不知道，怎么能减少蛋白的自连。
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8楼2011-06-18 20:50:20
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whil86

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ashui001 at 2011-06-15 12:24:10:
白色絮状的东西有可能是BSA本身互相交联产生的团聚物，可以考虑降低EDC的用量，或者BSA的用量
以上只是猜测，仅供参考

嗯嗯，好的，我现在在摸索最佳连接量，不知道我摸索连接量是不是有实际性的作用。
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9楼2011-06-18 20:51:42
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微小瓜虫

新虫 (小有名气)
★
whil86(金币+1):谢谢参与
貌似BSA的自身交联很不可避免了
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10楼2011-10-21 09:41:34
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injectable

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
投料BSA浓度太高了
已经交联过度了
应该先加EDC和纳米粒子活化
再加少量BSA
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11楼2011-10-21 10:43:06
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yangshen1987

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你的EDC是盐酸盐的吗？是哪里买的
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12楼2011-10-25 11:34:01
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
这个估计是你的BSA自身发生反应，聚合了
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13楼2011-10-27 09:22:16
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)
你做的时候应该控制加入反应物的顺序和量，我觉得首先你应采用EDC活化你的纳米粒子，而后在投入过量的BSA
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14楼2011-10-27 09:24:02
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yaiqi-87

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2268104楼: Originally posted by zoujie at 2011-10-27 09:24:02
你做的时候应该控制加入反应物的顺序和量，我觉得首先你应采用EDC活化你的纳米粒子，而后在投入过量的BSA

我做过表面带羧基的磁纳米，EDC活化后，未加入蛋白就出现絮状物了，求教如何解决，谢谢！
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15楼2012-12-13 13:45:17
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zoujie

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-12-13 22:29:55
引用回帖:
2464323楼: Originally posted by yaiqi-87 at 2012-12-13 13:45:17
我做过表面带羧基的磁纳米，EDC活化后，未加入蛋白就出现絮状物了，求教如何解决，谢谢！...

应该是你的纳米粒子表面除了羧基还有羟基或者氨基，而发生了那里粒子之间的反应吧。
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yaiqi-87
16楼2012-12-13 17:23:49
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yaiqi-87

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
引用回帖:
2464406楼: Originally posted by zoujie at 2012-12-13 17:23:49
应该是你的纳米粒子表面除了羧基还有羟基或者氨基，而发生了那里粒子之间的反应吧。...

那对于这种凝絮，有什么解决方法没？
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17楼2012-12-13 17:57:31
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shanxiaoyue

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我看文献里要的就是沉淀，离心后把沉淀分散在缓冲溶液中就是探针了，我还做不出沉淀呢
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18楼2013-06-04 20:47:10
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