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Tracyli

铁虫 (正式写手)

[求助] 药动学实验血样HPLC出现鬼峰,求帮忙,谢谢!!!

做一个单体化合物的药动学实验,建立血样的HPLC分析方法时出现以下情况:
我的标准品是在11分钟出峰的,然后空白血浆样品4.3分钟有一个峰,第11分钟也有一个峰,与对照品峰出峰时间一样,后来,单独用色谱纯乙腈或者甲醇空白溶液进针,均在4.3和11分钟左右有上述两个鬼峰,不知道什么原因,最后试了一下不进样品,单纯跑流动相则没有上述两个鬼峰,换过液相机子也出现同样情况。
哪位虫友也出现过这样的情况呢?请大家帮帮忙,谢谢!!!!!
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jack0657

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Tracyli(金币+1): 好的,非常感谢!!! 2011-06-20 12:30:25
那可能是一些很粘的东西,不好洗。试下直接用流动相走个旁路。
以下是我在别的地方看到的,别人的鬼峰心得。希望能帮到你。
鬼峰原因:
1、样品——溶剂,容器,过滤装置;在确定是否鬼峰的过程中,样品的原因多半可以被排除掉。
2、流动相——流动相用久了易变质,若只添加不更新或更新时不清洗溶剂瓶,便有污染物残留于瓶中,进入系统产生鬼峰;还有就是仪器上的吸液滤头,道理跟溶剂瓶一样;配制流动相的试剂、移取器具、过滤装置,也都有可能污染。
3、系统部件污染——进样针、在线过滤器、切换阀、单向阀,甚至密封圈,都有可能。当然进样针是首先被check的,因为很容易。
4、检测器——流通池脏了的话,也会产生很令人头疼的问题。
5、柱子——强保留物质造成杯具。
6、RP——我觉得这个比前面所有的都重要多了,技术问题总有办法解决,运气却无计可施,烧高香老天爷都未必帮你呐。
10楼2011-06-19 22:13:17
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jack0657

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

Tracyli(金币+5): 可能我说得不够清楚, 2011-06-18 19:13:08
走的是梯度吗?波长??不太清楚你的情况。
换机子也有,会不会两部机子都被同个项目给污染啦?溶剂抽头,比例阀,泵,单向阀,进样器,柱子,检测器。这些你都确保干净吗?
也有可能是流动相脏了,特别是水相。
2楼2011-06-16 23:19:25
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netsking

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

Tracyli(金币+5): 建了很多方法,换了很多台机子和柱子了 2011-06-18 19:13:47
重新建立方法吧, 你也不知道何时这种峰还会出现.
3楼2011-06-17 00:50:05
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

流动相、检测波长?如果不同的仪器都这样,可以排除进样阀污染的问题,至于具体原因,信息太少,不好分析。
4楼2011-06-17 08:44:02
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