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xukun1176

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】求帮忙分析一下我的HPLC图 已有8人参与

[img][/img]

流动相是:
   A:H20(含0.1%TFA)   B:乙腈(含0.1%TFA)

洗脱条件均为:
                   A(%)             B(%)
0min                 95                   5
10min               95                   5
60min               0                   100
70min               0                   100
流速为1ml/min;

我没上样品,是用超纯水空跑的,为什么出现这么多峰呢?
我用了两根不同的柱子试过,并且也重新更换过流动相了,可跑出来的图还是这样,为什么呢?
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oxygen7341

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
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happy169(金币+2):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-20 09:03:44
太神奇了,但是我还是想解释一下
一般出峰的,都是有东西的,这个东西的来源,无外内在的和外在的
内在的,就是柱子里面的,这个你通过两个柱子实验来排除了
外在在,就多了。你进样的溶剂,干净吗,你的进样针干净吗,你要是自动进样器,你的进样器污染了吗,针坐那里有污染吗,要是接预柱,你的预柱是新的吗,还有,你是有白头吗,会不会是白头污染
结论,要是你系统污染了,洗洗吧,看你是在高有机相出来的,就用高有机相比较冲冲,把你针和针坐洗洗,如果是手动的,把你的进样通道好好洗洗。我只能想到这么多了。
2楼2010-11-17 23:03:37
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小醇醇

木虫 (正式写手)

攀登者~

★ ★
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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-20 09:03:53
会不会是试剂有问题
流动相还有柱子的原因都排除的话
检测器的缘故?跑别的流动相的时候空白如何
即使是走过无数次的路,也能走到从未踏足过的地方;正因为是走过无数次的路,景色才会变幻万千
3楼2010-11-18 08:31:39
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lyfei999

金虫 (正式写手)

★ ★
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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-20 09:03:59
可能是柱子污染根本就没冲洗干净,再一个就是因为本身流动相就很难平衡,所以要多平衡一段时间,一般这样的流动相要过滤才可以的
4楼2010-11-18 10:29:41
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mooncake_333

铜虫 (小有名气)

★
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同意二楼说法,系统出问题了
5楼2010-11-18 10:40:27
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meito

银虫 (正式写手)

★ ★
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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-20 09:04:08
既然楼主排除了不是柱子问题,不是流动相问题,那就把仪器管道先彻底洗洗呗,把检测池冲冲再说
6楼2010-11-18 10:40:51
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海之冰

新虫 (初入文坛)

★ ★
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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-20 09:04:13
用同样的条件换一台仪器做一做,就知道是不是仪器的原因了
让生如夏花之绚丽!
7楼2010-11-18 10:59:31
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wxblndl

金虫 (小有名气)

★ ★
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happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-20 09:04:21
三氟乙酸时间长了会产生污染,也就是你的流动相有问题
8楼2010-11-18 21:53:35
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chencuijie

金虫 (小有名气)

★
happy169(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-11-20 09:04:27
再进行空白试验,换柱子,换设备等试试
9楼2010-11-19 09:36:08
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