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sn198651

银虫 (初入文坛)

[交流] SOB培养基与LB培养基做大肠杆菌感受态哪个更好已有7人参与

网上找不到SOB培养基的原理及配方
谁知道
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gwbk

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
从来不用LB,只用SOC的说~~~实验室的所有SOC都是我配置的,哇哈哈哈
6楼2011-06-11 19:20:10
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查看全部 8 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-06-10 15:15:04
dhd997(EPI+1): good 2011-06-10 19:23:15
是你没有找还是网上真的没有SOB的配方呢?
Google 中输入:SOB medium

很多的。。。


其实一般情况下我们用SOC培养基来做大肠杆菌感受态细胞。SOC培养基比SOB多加了葡糖糖(100ml里添加2ml1M的Glucose);当然了好一点的LB也可以,所谓好一点的LB就是蛋白胨是国外进口的纯度好一点,纯度高的蛋白胨是稍微泛点绿色的。。。

其实个人认为感受态细胞的效率高低跟很多因素有关系,培养基是一种,培养基只是保证菌体生长的好不好;而具体的操作过程中,要清洗菌体,还要低温操作,等等均会影响感受态细胞的效率的。。。

[ Last edited by 天使托 on 2011-6-10 at 16:21 ]
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-06-10 15:04:10
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beautybanana

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-10 20:20:27
引用回帖:
Originally posted by sn198651 at 2011-06-10 14:55:59:
网上找不到SOB培养基的原理及配方
谁知道

给你标准的如下:(来源于TAKARA)
(SOB培养基)
组分浓度:2%(W/V) Tryptone
                0.5%(W/V) Yeast Extract
               0.05%(W/V) NaCl
               2.5mM       KCl
              10mM MgCl2
配制量 1L
配制方法:
1.配制250mM KCl溶液:在90ml的去离子水中溶解1.86gKCl后,定容 至100ml
2.配制2M MgCl2溶液:在 90ml的去离子水中溶解19gMgCl2,定容 至100ml
,高温高压灭菌
3.称取下列试剂置于1L烧杯中:  
Tryptone         20g
Yeast Extract     5g
NaCl                 0.5g
4.加入约800ml的去离子水,充分溶解搅拌
5.量取10ml 250mM KCl溶液,加入到烧杯中
6.滴加5N NaCl溶液(约0.2ml).调节pH至7.0
7.加入去离子水将培养基定容至1L
8.高温高压灭菌后,4℃保存
9.使用前加入5ml的2M MgCl2溶液
4楼2011-06-10 16:18:21
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+5, EPI+1): 回答了楼主另一个问题。很有经验啊! 2011-06-11 03:44:09
其它条件一样的话,用 SOB 转化效率确实会高一些,对于转化子少时较明显,约是LB的1.5-2倍吧,平常T克隆本来就长得满满的,差别其实就看不出来了。
生命不息,探索不止。
5楼2011-06-10 20:32:45
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