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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » SOB培养基与LB培养基做大肠杆菌感受态哪个更好
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
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1949stone(金币+2): 鼓励 2011-06-10 15:15:04
dhd997(EPI+1): good 2011-06-10 19:23:15
是你没有找还是网上真的没有SOB的配方呢？
Google 中输入：SOB medium

很多的。。。


其实一般情况下我们用SOC培养基来做大肠杆菌感受态细胞。SOC培养基比SOB多加了葡糖糖（100ml里添加2ml1M的Glucose）；当然了好一点的LB也可以，所谓好一点的LB就是蛋白胨是国外进口的纯度好一点，纯度高的蛋白胨是稍微泛点绿色的。。。

其实个人认为感受态细胞的效率高低跟很多因素有关系，培养基是一种，培养基只是保证菌体生长的好不好；而具体的操作过程中，要清洗菌体，还要低温操作，等等均会影响感受态细胞的效率的。。。

[ Last edited by 天使托 on 2011-6-10 at 16:21 ]
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2楼2011-06-10 15:04:10
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智能机器人

Robot (super robot)

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beautybanana

木虫 (著名写手)
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amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-10 20:20:27
引用回帖:
Originally posted by sn198651 at 2011-06-10 14:55:59:
网上找不到SOB培养基的原理及配方
谁知道

给你标准的如下：（来源于TAKARA）
（SOB培养基）
组分浓度：2%（W/V) Tryptone
                0.5%(W/V) Yeast Extract
               0.05%(W/V) NaCl
               2.5mM       KCl
              10mM MgCl2
配制量 1L
配制方法：
1.配制250mM KCl溶液:在90ml的去离子水中溶解1.86gKCl后，定容 至100ml
2.配制2M MgCl2溶液：在 90ml的去离子水中溶解19gMgCl2，定容 至100ml
，高温高压灭菌
3.称取下列试剂置于1L烧杯中：  
Tryptone         20g
Yeast Extract     5g
NaCl                 0.5g
4.加入约800ml的去离子水，充分溶解搅拌
5.量取10ml 250mM KCl溶液，加入到烧杯中
6.滴加5N NaCl溶液（约0.2ml).调节pH至7.0
7.加入去离子水将培养基定容至1L
8.高温高压灭菌后，4℃保存
9.使用前加入5ml的2M MgCl2溶液
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4楼2011-06-10 16:18:21
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
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西瓜(金币+5, EPI+1): 回答了楼主另一个问题。很有经验啊！ 2011-06-11 03:44:09
其它条件一样的话，用 SOB 转化效率确实会高一些，对于转化子少时较明显，约是LB的1.5-2倍吧，平常T克隆本来就长得满满的，差别其实就看不出来了。
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生命不息，探索不止。
5楼2011-06-10 20:32:45
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