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SOB培养基与LB培养基做大肠杆菌感受态哪个更好 已有7人参与
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 网上找不到SOB培养基的原理及配方谁知道  |
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 【分子生物】EPI帖 |
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天使托
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1949stone(金币+2): 鼓励 2011-06-10 15:15:04
dhd997(EPI+1): good 2011-06-10 19:23:15
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dhd997(EPI+1): good 2011-06-10 19:23:15
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是你没有找还是网上真的没有SOB的配方呢？ Google 中输入：SOB medium 很多的。。。  其实一般情况下我们用SOC培养基来做大肠杆菌感受态细胞。SOC培养基比SOB多加了葡糖糖（100ml里添加2ml1M的Glucose）；当然了好一点的LB也可以，所谓好一点的LB就是蛋白胨是国外进口的纯度好一点，纯度高的蛋白胨是稍微泛点绿色的。。。 其实个人认为感受态细胞的效率高低跟很多因素有关系，培养基是一种，培养基只是保证菌体生长的好不好；而具体的操作过程中，要清洗菌体，还要低温操作，等等均会影响感受态细胞的效率的。。。 [ Last edited by 天使托 on 2011-6-10 at 16:21 ] |
2楼2011-06-10 15:04:10
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3楼2011-06-10 15:46:34
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amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-10 20:20:27
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给你标准的如下：（来源于TAKARA） （SOB培养基） 组分浓度：2%（W/V) Tryptone 0.5%(W/V) Yeast Extract 0.05%(W/V) NaCl 2.5mM KCl 10mM MgCl2 配制量 1L 配制方法： 1.配制250mM KCl溶液:在90ml的去离子水中溶解1.86gKCl后，定容 至100ml 2.配制2M MgCl2溶液：在 90ml的去离子水中溶解19gMgCl2，定容 至100ml ，高温高压灭菌 3.称取下列试剂置于1L烧杯中： Tryptone 20g Yeast Extract 5g NaCl 0.5g 4.加入约800ml的去离子水，充分溶解搅拌 5.量取10ml 250mM KCl溶液，加入到烧杯中 6.滴加5N NaCl溶液（约0.2ml).调节pH至7.0 7.加入去离子水将培养基定容至1L 8.高温高压灭菌后，4℃保存 9.使用前加入5ml的2M MgCl2溶液 |
4楼2011-06-10 16:18:21
Arrennew
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5楼2011-06-10 20:32:45
gwbk
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6楼2011-06-11 19:20:10
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