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phross

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 毛细管电泳分离

两物质,等电点分别为5.7和5.2,运行缓冲液的pH调为多少合适,从7.4到9.2都尝试过,分不开。
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phross

至尊木虫 (著名写手)

顶起来,做CE的虫友给点建议。
2楼2011-06-07 12:04:09
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lee10yie

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

phross(金币+2): 2011-06-07 23:24:24
缓冲液pH选择5.2-5.7之间的一个,如pH=5.5,这样一个物质带正电,一个带负电,用毛细管区带电泳应该可以分离,lz可以试试。
3楼2011-06-07 20:36:09
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

【答案】应助回帖

phross(金币+2): 2011-06-07 23:24:34
同意楼上说法,不过建议楼主选择在pH5.5缓冲容量大一些的buffer。
另外,两个能否顺利分开,关键还要看样品的结构。
七窍通了六窍
4楼2011-06-07 21:04:39
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phross

至尊木虫 (著名写手)

我也想过这一情况,但很奇怪的是国外的文献报道用pH7.4的磷酸盐以及9.2的硼酸都比较好的分开了。我这两个组分均为两性物质,具有两个不同的解离常数,其等电点如上所述。我再试试看,用醋酸盐看能否分开。
5楼2011-06-07 23:27:17
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

【答案】应助回帖

phross(金币+2): 2011-06-08 22:09:07
可以用一些生物缓冲体系,比如Tris体系。
七窍通了六窍
6楼2011-06-08 20:33:14
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joker6677

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

phross(金币+2): 2011-06-08 22:08:58
引用回帖:
Originally posted by platto at 2011-06-08 20:33:14:
可以用一些生物缓冲体系,比如Tris体系。

CE不是有些专门的试剂盒  都是针对蛋白质,DNA,等 不知道楼主的分析物是生物制品不
7楼2011-06-08 20:59:29
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phross

至尊木虫 (著名写手)

其实我测的是酪氨酸和多巴,两个都是酚酸,且都带有丙氨酸侧链,前者比后者就少一个酚羟基。Tris试过,不行。继续求助。
8楼2011-06-08 22:12:24
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phross

至尊木虫 (著名写手)

自己再顶下。
9楼2011-06-13 10:22:05
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