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小嫩瓜

木虫 (小有名气)

[求助] 从复合菌系中分离单菌进行纯化培养——有做这方面的朋友吗?

我们实验室通过富集培养得到了这么一种能够降解纤维素的复合菌系,我现在的任务就是想把复合菌系中能培养的菌分离出来。。。。可是涂布了好多批,每次长的菌都不一样。
我都不知道该如何往下进行,想看看有没有做这方面的朋友,给予一点指导一点建议
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活的艰辛是因为执着和不放弃
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redbull2011

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5, EPI+1): 谢谢交流哦~ 2011-06-03 08:54:44
恰巧我正在做这方面的实验,我的方法供楼主参考:
1、首先明确细菌的培养条件,需氧?厌氧?对营养要求高不高?(尽量选营养丰富的培养基);
2、将混合菌种不稀释涂平板,看目标活性菌是否在平板上生长;
3、将混合菌种稀释后涂板,多涂几个梯度,得到长满单个菌落的平板。比如一块平板有40个菌落,那将这40个全部培养起来,分成四组,每组菌混合后验证是否有产物,全部40个菌混合实验作为对照;如果其中某组有产物,则将这10个菌分为两组,再验证;最后验证少数几个单菌。

我自己这么做的,筛选得到三个菌,它们共同作用得到某个产物。
8楼2011-06-02 17:57:09
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redbull2011

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引用回帖:
Originally posted by 小嫩瓜 at 2011-06-03 14:09:28:
那你是不是不管这40个菌落是否有的是同一种菌?全都培养啊!还有两两组合你需要保证他们是1:1组合的吗?

最近在外活动 没能及时回复

40个菌,用液体培养基培养起来。每组10个菌,每个取200ul,然后将它们全部混合,再验证活性。这个量自己按照需要定。
这些单菌不管是不是同一种,筛选到活性菌以后再鉴定。
10楼2011-06-03 19:41:25
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