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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » 大家帮我看看我的DGGE图怎么了
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在雨中

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
20楼: Originally posted by liyixmu at 2011-09-21 14:10:15:
嘿嘿，不是担心盗图，怎么会呢？我自己写了个帖子把图写贴出来了，我再贴一下吧呵呵。我又试了50-70.还是不行，我今天再试试45-55的吧。到时候再让你看看图。看看能不能跑开，谢谢了。
[eimg]91/86/1407892_1316 ...

条带还算你可以，就是有点发散。确实可以收窄一些，估计下你的条带所在的梯度位置，再稍微收窄，把你的电泳条件保持原来的就可以了。祝福你成功。
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21楼2011-09-21 14:24:18
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良缘百合

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by cyunzhao at 2011-08-16 13:41:02:
楼主，我现在也是做土壤DGGE，也是只有两条条带，请问你最后怎么解决的的啊

不好意思，现在刚看到帖子。
说起来很好笑，我是因为温度没有设置好而白费了两个月。现在温度调整好了还可以
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爱家人爱学习爱生活
22楼2011-11-04 08:33:34
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攸攸乐也

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
22楼: Originally posted by 良缘百合 at 2011-11-04 08:33:34:
不好意思，现在刚看到帖子。
说起来很好笑，我是因为温度没有设置好而白费了两个月。现在温度调整好了还可以

您好。电泳温度你用的是多少？60度？你有没有遇到跑不出来的情况？就是什么条带都没有。
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23楼2011-12-30 14:25:46
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在雨中

金虫 (著名写手)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 攸攸乐也 at 2011-12-30 14:25:46:
您好。电泳温度你用的是多少？60度？你有没有遇到跑不出来的情况？就是什么条带都没有。

一般DGGE电泳的温度会设置为55°或者60°，一般60°的多一些。
这个电泳温度不是我们费心思的重点。注意实验细节。
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24楼2011-12-30 17:10:36
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攸攸乐也

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
24楼: Originally posted by 在雨中 at 2011-12-30 17:10:36:
一般DGGE电泳的温度会设置为55°或者60°，一般60°的多一些。
这个电泳温度不是我们费心思的重点。注意实验细节。

能注意的都注意了……很抓狂……要不你提点提点？看看还有哪些地方该注意的。我没辙了……
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25楼2011-12-30 23:54:26
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房子123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by guolina1986 at 2011-05-31 10:10:37:
楼主，我现在在提土壤里的DNA，用了各种方法都不行？我是直接采新鲜土样提取的，需不需要风干之类的前处理哦？

最好用新鲜样品啊，或者放在-80℃下保存。
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26楼2012-02-13 22:11:25
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wangning__

木虫 (正式写手)
引用回帖:
344420楼: Originally posted by 良缘百合 at 2011-05-26 17:40:30
最近DGGE条带一直是2-3条，我的样品是土壤，应该至少有一、二十条才对的，这到底是为什么啊？
求有经验的虫友帮忙分析一下啊，多谢多谢多谢……

DGGE前PCR，条带约230bp

下面是DGGE的一些条件、DGGE前PCR图片 ...

请问LZ这个问题最后你怎么解决的啊？我也出现这个问题了，希望你不吝赐教啊！
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乌拉拉
27楼2013-01-21 12:30:41
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zhang226296

新虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 在雨中 at 2011-09-21 09:13:51
如果你的条带很集中。那么你就应该把你的电泳胶浓度再收窄一些，比如45-55%。这样你的条带就分开的更开一些，不过这个是不是太窄了？我对细菌电泳V3区，一般选择30-70%左右的梯度，样品条带比较多，最多50种条带。
...

求助，我开始做DGGE,胶浓度45%-60%时，条带在胶的中下部，而且只有三条，MARKER跑出来2000,1000和750的条带，第二天我换成50%-65%时，条带在中上部，也只有三条，MARKER六条带都跑出来了，100,250,500离得很近，这是为什么呢，是我的胶浓度还没调对吗，应该上调还是下调啊，求高手给点意见，谢谢啊
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28楼2014-03-02 21:55:08
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在雨中

金虫 (著名写手)
引用回帖:
28楼: Originally posted by zhang226296 at 2014-03-02 21:55:08
求助，我开始做DGGE,胶浓度45%-60%时，条带在胶的中下部，而且只有三条，MARKER跑出来2000,1000和750的条带，第二天我换成50%-65%时，条带在中上部，也只有三条，MARKER六条带都跑出来了，100,250,500离得很近，这 ...

你确信没搞错？DGGE还有marker的？？？？？
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29楼2014-03-03 12:10:05
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zhang226296

新虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by liyixmu at 2011-09-21 10:00:29
非常感谢！不过我也不知道怎么回事，我又试了个50-70%的胶浓度。还是没跑开。我觉得把胶范围收窄点试试吧，就像你说的45-55%。还有预电泳是在上样前，对胶进行电泳吗？我们实验室大多数都是上完样再进行预电泳，我 ...

我也遇到同样的问题，你后面是怎么解决的啊，就赐教，真心求赐教，因为没有师哥师姐求助，就只能求虫友们了，
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30楼2014-03-18 14:17:04
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