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在雨中

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

引用回帖:
20楼: Originally posted by liyixmu at 2011-09-21 14:10:15:
嘿嘿,不是担心盗图,怎么会呢?我自己写了个帖子把图写贴出来了,我再贴一下吧呵呵。我又试了50-70.还是不行,我今天再试试45-55的吧。到时候再让你看看图。看看能不能跑开,谢谢了。
[eimg]91/86/1407892_1316 ...

条带还算你可以,就是有点发散。确实可以收窄一些,估计下你的条带所在的梯度位置,再稍微收窄,把你的电泳条件保持原来的就可以了。祝福你成功。
21楼2011-09-21 14:24:18
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良缘百合

金虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by cyunzhao at 2011-08-16 13:41:02:
楼主,我现在也是做土壤DGGE,也是只有两条条带,请问你最后怎么解决的的啊

不好意思,现在刚看到帖子。
说起来很好笑,我是因为温度没有设置好而白费了两个月。现在温度调整好了还可以
爱家人爱学习爱生活
22楼2011-11-04 08:33:34
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攸攸乐也

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
22楼: Originally posted by 良缘百合 at 2011-11-04 08:33:34:
不好意思,现在刚看到帖子。
说起来很好笑,我是因为温度没有设置好而白费了两个月。现在温度调整好了还可以

您好。电泳温度你用的是多少?60度?你有没有遇到跑不出来的情况?就是什么条带都没有。
23楼2011-12-30 14:25:46
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在雨中

金虫 (著名写手)


引用回帖:
1楼: Originally posted by 攸攸乐也 at 2011-12-30 14:25:46:
您好。电泳温度你用的是多少?60度?你有没有遇到跑不出来的情况?就是什么条带都没有。

一般DGGE电泳的温度会设置为55°或者60°,一般60°的多一些。
这个电泳温度不是我们费心思的重点。注意实验细节。
24楼2011-12-30 17:10:36
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攸攸乐也

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
24楼: Originally posted by 在雨中 at 2011-12-30 17:10:36:
一般DGGE电泳的温度会设置为55°或者60°,一般60°的多一些。
这个电泳温度不是我们费心思的重点。注意实验细节。

能注意的都注意了……很抓狂……要不你提点提点?看看还有哪些地方该注意的。我没辙了……
25楼2011-12-30 23:54:26
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房子123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by guolina1986 at 2011-05-31 10:10:37:
楼主,我现在在提土壤里的DNA,用了各种方法都不行?我是直接采新鲜土样提取的,需不需要风干之类的前处理哦?

最好用新鲜样品啊,或者放在-80℃下保存。
26楼2012-02-13 22:11:25
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wangning__

木虫 (正式写手)

引用回帖:
344420楼: Originally posted by 良缘百合 at 2011-05-26 17:40:30
最近DGGE条带一直是2-3条,我的样品是土壤,应该至少有一、二十条才对的,这到底是为什么啊?
求有经验的虫友帮忙分析一下啊,多谢多谢多谢……

DGGE前PCR,条带约230bp

下面是DGGE的一些条件、DGGE前PCR图片 ...

请问LZ这个问题最后你怎么解决的啊?我也出现这个问题了,希望你不吝赐教啊!
乌拉拉
27楼2013-01-21 12:30:41
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zhang226296

新虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 在雨中 at 2011-09-21 09:13:51
如果你的条带很集中。那么你就应该把你的电泳胶浓度再收窄一些,比如45-55%。这样你的条带就分开的更开一些,不过这个是不是太窄了?我对细菌电泳V3区,一般选择30-70%左右的梯度,样品条带比较多,最多50种条带。
...

求助,我开始做DGGE,胶浓度45%-60%时,条带在胶的中下部,而且只有三条,MARKER跑出来2000,1000和750的条带,第二天我换成50%-65%时,条带在中上部,也只有三条,MARKER六条带都跑出来了,100,250,500离得很近,这是为什么呢,是我的胶浓度还没调对吗,应该上调还是下调啊,求高手给点意见,谢谢啊
28楼2014-03-02 21:55:08
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在雨中

金虫 (著名写手)


引用回帖:
28楼: Originally posted by zhang226296 at 2014-03-02 21:55:08
求助,我开始做DGGE,胶浓度45%-60%时,条带在胶的中下部,而且只有三条,MARKER跑出来2000,1000和750的条带,第二天我换成50%-65%时,条带在中上部,也只有三条,MARKER六条带都跑出来了,100,250,500离得很近,这 ...

你确信没搞错?DGGE还有marker的?????
29楼2014-03-03 12:10:05
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zhang226296

新虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by liyixmu at 2011-09-21 10:00:29
非常感谢!不过我也不知道怎么回事,我又试了个50-70%的胶浓度。还是没跑开。我觉得把胶范围收窄点试试吧,就像你说的45-55%。还有预电泳是在上样前,对胶进行电泳吗?我们实验室大多数都是上完样再进行预电泳,我 ...

我也遇到同样的问题,你后面是怎么解决的啊,就赐教,真心求赐教,因为没有师哥师姐求助,就只能求虫友们了,
30楼2014-03-18 14:17:04
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