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caojinxuan银虫 (正式写手)
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请教大家一个问题--提质粒
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我将保存在BL21中的质粒进行培养提质粒，具体操作是将100ul甘油菌加入5mlLB培养基中，同时加入卡那霉素（30ug/ml），摇床培养，可是都快2天了，培养基依旧是澄清的，请问这是什么原因啊？ [ Last edited by 1949stone on 2011-5-24 at 15:41 ] |
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 【分子生物】EPI帖 |
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3楼2011-05-24 14:28:22
lly198784
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【答案】应助回帖
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caojinxuan(金币+1): 谢谢 2011-05-24 17:21:40
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-05-24 21:09:49
caojinxuan(金币+1): 谢谢 2011-11-17 09:55:09
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caojinxuan(金币+1): 谢谢 2011-11-17 09:55:09
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应该是菌株保存的问题，你想办法把菌株活化起来。 菌株保存出问题的可能原因有： （1）保存时菌株活化不充分，菌株量少 （2）保存菌株时，甘油量太少，菌株冻死了 （3）保存问题不对，菌株又在生长，死菌较多 由于菌株保存不当引起菌株量少，那现在活化就要用非常办法了。 （1）扩大接种量，多接些甘油菌，转速放大，温度30，看能不能活化起来 （2）不加抗生素先培养，把菌先活化起来，当然也可以放大接种量，等活化起来后，在转接到有抗生素的培养基中 （3）先用固体培养基培养，在转接到液体培养基中，固体中开始也可以不加抗生素，等长出菌落后在利用抗生素筛选。 （4）在不行，就只能重新搞了 “东西是活的，人是死的”,想想办法嘛，嘿嘿！ 祝你实验成功！！ |
4楼2011-05-24 14:40:22
caojinxuan
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