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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zcqcau

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 关于一抗二抗杂交

鉴于实验室设备较差，老板认为一抗二抗孵育的时候不用摇床，也就是说是静置杂交，就可以，但是我心里很没有底，所以想请教高手。可否？？

真是悲催的人生啊 实验室设备让我想哭
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将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
1楼 2011-05-12 17:01:10
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jhu132llh

无虫

大洪
★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-05-15 09:44:11
引用回帖:
Originally posted by zcqcau at 2011-05-15 08:34:46:
请问一抗和二抗能二次使用吗？效果如何？如何存储才可以？

如果是做WB
可以二次使用
短期就储存在4度就可以了
时间长了最好就别用了
要是做免疫组化或者免疫荧光的话
最好是别二次使用了
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
10楼2011-05-15 08:53:29
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314300420

新虫

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-05-12 19:01:16
zcqcau(金币+2): 谢谢 2011-05-13 08:30:23
可以不用摇床，但你得先将抗体混匀了。我做WB孵育一抗就是先将抗体混匀，然后放4℃过夜，不用摇。
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2楼2011-05-12 17:47:22
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jhu132llh

新虫

大洪

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-05-12 20:09:00
那就静置咯
一抗是可以加上后4度静置过夜的
然后洗去非特异性结合的一抗
然后就可以选择啦：
1.PBS中浸泡组织或细胞至下午，上二抗，然后二抗过夜
2.白天上二抗，25度下静置1.5-2小时
本来我们是在25度下0.5-1小时的，但是要静置的话可能需要时间要长点，给你加到1.5-2小时，应该是能充分反应的，你摸索一下试试，要是不够就再长点时间，要是过头了，就减点时间；
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
3楼2011-05-12 19:56:28
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zcqcau

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
Originally posted by 314300420 at 2011-05-12 17:47:22:
可以不用摇床，但你得先将抗体混匀了。我做WB孵育一抗就是先将抗体混匀，然后放4℃过夜，不用摇。

一抗和二抗的孵育时间比较长的话会有什么问题？
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将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
4楼2011-05-13 08:31:08
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