应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于一抗二抗杂交
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 3131  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

zcqcau

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 关于一抗二抗杂交

鉴于实验室设备较差，老板认为一抗二抗孵育的时候不用摇床，也就是说是静置杂交，就可以，但是我心里很没有底，所以想请教高手。可否？？

真是悲催的人生啊 实验室设备让我想哭
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
1楼 2011-05-12 17:01:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

314300420

新虫

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-05-12 19:01:16
zcqcau(金币+2): 谢谢 2011-05-13 08:30:23
可以不用摇床，但你得先将抗体混匀了。我做WB孵育一抗就是先将抗体混匀，然后放4℃过夜，不用摇。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-05-12 17:47:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhu132llh

禁虫

大洪

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-05-12 20:09:00
那就静置咯
一抗是可以加上后4度静置过夜的
然后洗去非特异性结合的一抗
然后就可以选择啦：
1.PBS中浸泡组织或细胞至下午，上二抗，然后二抗过夜
2.白天上二抗，25度下静置1.5-2小时
本来我们是在25度下0.5-1小时的，但是要静置的话可能需要时间要长点，给你加到1.5-2小时，应该是能充分反应的，你摸索一下试试，要是不够就再长点时间，要是过头了，就减点时间；
赞一下(1人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
3楼2011-05-12 19:56:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zcqcau

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
Originally posted by 314300420 at 2011-05-12 17:47:22:
可以不用摇床，但你得先将抗体混匀了。我做WB孵育一抗就是先将抗体混匀，然后放4℃过夜，不用摇。

一抗和二抗的孵育时间比较长的话会有什么问题？
赞一下 回复此楼
将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
4楼2011-05-13 08:31:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zcqcau

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-05-12 19:56:28:
那就静置咯
一抗是可以加上后4度静置过夜的
然后洗去非特异性结合的一抗
然后就可以选择啦：
1.PBS中浸泡组织或细胞至下午，上二抗，然后二抗过夜
2.白天上二抗，25度下静置1.5-2小时
本来我们是在25度下0. ...

一抗和二抗的孵育时间比较长的话会有什么问题？

譬如5-6甚至8-9个小时
赞一下 回复此楼
将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
5楼2011-05-13 08:31:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhu132llh

新虫

大洪

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-05-13 09:17:02
zcqcau(金币+2): XX 2011-05-14 07:43:23
引用回帖:
Originally posted by zcqcau at 2011-05-13 08:31:38:
一抗和二抗的孵育时间比较长的话会有什么问题？

譬如5-6甚至8-9个小时

引起非特异性染色较高
就是背景太深
容易引起假阳性结果与阳性结果的不好区分
赞一下(1人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
6楼2011-05-13 08:55:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

如来神掌

禁虫

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 欢迎分享经验。 2011-05-13 17:49:17
zcqcau(金币+1): XX 2011-05-14 07:43:30
4度静置 过夜 是经常的操作

不要郁闷 蛋白没那么金贵的

实在不放心 你就过一会去摇晃一下

希望你实验顺利
赞一下(2人) 回复此楼
生活就像直播,没有彩排的机会,不可能从新来过!所以必须把握好现在的每一个瞬间!
7楼2011-05-13 17:29:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zcqcau

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
Originally posted by 如来神掌 at 2011-05-13 17:29:51:
4度静置 过夜 是经常的操作

不要郁闷 蛋白没那么金贵的

实在不放心 你就过一会去摇晃一下

希望你实验顺利

请问一抗和二抗能二次使用吗？效果如何？如何存储才可以？
赞一下 回复此楼
将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
8楼2011-05-15 08:34:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zcqcau

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-05-13 08:55:03:
引起非特异性染色较高
就是背景太深
容易引起假阳性结果与阳性结果的不好区分

请问一抗和二抗能二次使用吗？效果如何？如何存储才可以？
赞一下 回复此楼
将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
9楼2011-05-15 08:34:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhu132llh

无虫

大洪
★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-05-15 09:44:11
引用回帖:
Originally posted by zcqcau at 2011-05-15 08:34:46:
请问一抗和二抗能二次使用吗？效果如何？如何存储才可以？

如果是做WB
可以二次使用
短期就储存在4度就可以了
时间长了最好就别用了
要是做免疫组化或者免疫荧光的话
最好是别二次使用了
赞一下(1人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
10楼2011-05-15 08:53:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zcqcau 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856材料与化工调剂，339 +9 10213207 2026-03-31 9/450 2026-04-01 00:49 by fmesaito
[考研] 一志愿西安交大材料学硕（英一数二）347，求调剂到高分子/材料相关专业 +5 zju51 2026-03-31 7/350 2026-04-01 00:47 by fmesaito
[考研] 0856求调剂 +9 楒桉 2026-03-28 9/450 2026-03-31 19:06 by 暮泽12
[考研] 求收留 +8 1943443204 2026-03-28 8/400 2026-03-31 15:00 by -迷了路啊路
[考研] 一志愿211，335分，0856，求调剂院校和导师 +10 倾____萧 2026-03-27 11/550 2026-03-31 14:32 by fmesaito
[考研] 270求调剂 +3 小杰pp 2026-03-31 4/200 2026-03-31 12:59 by wxiongid
[考研] 287求调剂 +17 land xuxu 2026-03-26 17/850 2026-03-31 11:16 by Zzxxxs
[考研] 266分，求材料相关专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-03-30 12/600 2026-03-31 11:00 by 熊一刀
[考研] 313求调剂 +6 卖个关子吧 2026-03-31 6/300 2026-03-31 10:58 by Jaylen.
[考研] 0817化工学硕调剂 +7 努力上岸中！ 2026-03-31 7/350 2026-03-31 09:58 by nalakaiqi
[考研] 0856调剂 +6 曲听筠 2026-03-30 6/300 2026-03-31 09:44 by Jaylen.
[考研] 085602化工求调剂（331分） +8 111@127 2026-03-30 8/400 2026-03-30 21:23 by 研究僧导导
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 081200-314 +3 LILIQQ 2026-03-27 4/200 2026-03-28 09:41 by 保护地球你我做�
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭