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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 摇瓶发酵菌丝结团
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shenmofeng

新虫 (初入文坛)
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Originally posted by 郝钊 at 2011-05-11 00:14:20:
产酸低，残糖高是不是因为发酵时间还不够？可以摸一个时间的条件，看是不是发酵时间在影响产率。如果你想让菌丝球小一些，可以尝试加入玻璃珠或者弹簧之类的东西。菌丝球的大小可能是影响结果的一个因素，但是发酵 ...

现在的发酵时间已经是延长过的了，应该不是时间不够估计是菌体生长异常导致的
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11楼2011-05-11 10:33:16
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shenmofeng

新虫 (初入文坛)
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Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-11 01:41:13:
装液量看样子应该是三角瓶容积的五分之一左右，也就是说如果用的是500毫升的瓶子，你的装液量就是100毫升。这个装液量在200rpm的转速下培养基的转动情况是非常剧烈的，如果接种量比较大，菌丝球的大小也会比较小， ...

用的是250ml的瓶子装液40ml  “如果接种量比较大，菌丝球的大小也会比较小”，也就是说提高接种量可以让菌丝球变小？

木薯的确是没有去皮，用的是酒精厂里带回来的木薯干。

就如图所见，培养基粘壁比较严重，摇瓶上面那一圈培养基已经快干了。而且如你所说一段时间以后有黑曲霉在粘壁的培养基上面生长产孢子了（看着很不爽）。。。这也是我头疼的一个地方，本来装液量就只有40ml，再粘壁的话损失很大的，而且我觉得这让菌处于一个十分动荡恶劣的生长环境对其生长不利。有没有什么办法减轻粘壁（不降低转速）？还是黑曲霉摇瓶发酵都这样的？

木薯没有去渣，不知道工厂里用木薯发酵的话去不去渣？
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12楼2011-05-11 10:54:13
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shenmofeng

新虫 (初入文坛)
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Originally posted by microxy at 2011-05-10 11:20:00:
糖类的利用率不高，可能与生长不良有关，建议适当提高转速，或者降低培养液的粘度。

现在应该可以肯定是生长不良了，菌丝结团以后内部的菌体氧和营养摄入困难又加剧了生长异常，现在主要想找出导致结团的原因。
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13楼2011-05-11 11:02:03
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

1、        你是这么小的摇瓶发酵，如果要做什么培养基优化，我觉得最好还是用孢子接种。
2、        你的木薯没有去皮，皮是渣，没有营养的，最好自己刮掉。木薯也要按照工厂的要求来粉碎，要过多少目的筛子就照过。生产酒精的时候是过20目筛子的，不知道你这个要过多少目。原料粉碎之后渣会碎很多。
3、        你的液化醪是自己制作的吗？液化率能不能保证每次都一致？
4、        培养温度用30度不知道是否合适，也可能会有些影响的，我见有人优化过温度，也有人能没有用30度，他们都是用黑曲霉，不知道对于你的菌株你用的30度是不是最好的。
5、        摇床的转速也是，有人用300rpm的，你的200rpm不知道是不是经过优化过的。
6、        提高接种量确实是能够提高菌丝球数量和减小菌丝球尺寸的，因为在摇动的过程中菌丝球的生长也会受到影响，太密集了就长不开了。由于在摇动，菌丝球到一定大小之后不会纠缠在一起了。
7、        摇瓶发酵的时候瓶壁上的那一圈是不可避免的，不用在意这个问题。
8、        至于工厂里是不是离心，我觉得如果发酵罐太大，离心还是麻烦了些，但是去皮不麻烦。具体就要问问工厂里怎么做了，这个可能导师了解。
9、        菌丝球肯定是会形成的，凡是摇瓶培养，这个转速和这个装液量下应该都会形成，但是成菌丝球不一定是造成发酵异常的原因。
10、        你以前有没有做过黑曲霉产柠檬酸，感觉似乎经验少了些。附件放上一篇黑曲霉用木薯液化醪发酵产柠檬酸的国内文章，就是不知道是不是适合你。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
14楼2011-05-12 00:06:21
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5): 鼓励交流 2011-05-12 07:36:19
rainwander(EPI+1): 2011-05-12 07:36:23
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Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-12 00:06:21:
1、        你是这么小的摇瓶发酵，如果要做什么培养基优化，我觉得最好还是用孢子接种。
2、        你的木薯没有去皮，皮是渣，没有营养的，最好自己刮掉。木薯也要按照工厂的要求来粉碎，要过多少目的筛子就照过。生产酒精的 ...

这个是正式回复帖，因为上一张不能上传附件。

1、        你是这么小的摇瓶发酵，如果要做什么培养基优化，我觉得最好还是用孢子接种。
2、        你的木薯没有去皮，皮是渣，没有营养的，最好自己刮掉。木薯也要按照工厂的要求来粉碎，要过多少目的筛子就照过。生产酒精的时候是过20目筛子的，不知道你这个要过多少目。原料粉碎之后渣会碎很多。
3、        你的液化醪是自己制作的吗？液化率能不能保证每次都一致？
4、        培养温度用30度不知道是否合适，也可能会有些影响的，我见有人优化过温度，也有人能没有用30度，他们都是用黑曲霉，不知道对于你的菌株你用的30度是不是最好的。
5、        摇床的转速也是，有人用300rpm的，你的200rpm不知道是不是经过优化过的。
6、        提高接种量确实是能够提高菌丝球数量和减小菌丝球尺寸的，因为在摇动的过程中菌丝球的生长也会受到影响，太密集了就长不开了。由于在摇动，菌丝球到一定大小之后不会纠缠在一起了。
7、        摇瓶发酵的时候瓶壁上的那一圈是不可避免的，不用在意这个问题。
8、        至于工厂里是不是离心，我觉得如果发酵罐太大，离心还是麻烦了些，但是去皮不麻烦。具体就要问问工厂里怎么做了，这个可能导师了解。
9、        菌丝球肯定是会形成的，凡是摇瓶培养，这个转速和这个装液量下应该都会形成，但是成菌丝球不一定是造成发酵异常的原因。
10、        你以前有没有做过黑曲霉产柠檬酸，感觉似乎经验少了些。附件放上一篇黑曲霉用木薯液化醪发酵产柠檬酸的国内文章，就是不知道是不是适合你。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
15楼2011-05-12 00:09:02
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shenmofeng

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-12 00:06:21:
1、        你是这么小的摇瓶发酵，如果要做什么培养基优化，我觉得最好还是用孢子接种。
2、        你的木薯没有去皮，皮是渣，没有营养的，最好自己刮掉。木薯也要按照工厂的要求来粉碎，要过多少目的筛子就照过。生产酒精的 ...

我刚研一，从没做过这方面的东西，现在也没有师兄带。。。所以完全摸着石头过河
这篇文章我以前看过，不过还是要谢谢你，我会再认真看几遍的
再次感谢
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16楼2011-05-12 22:02:57
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yapingchen

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 感谢分享自己的实验经验 2011-05-22 07:53:57
我也有这样的情况，解决方法：将种子培养液经灭菌砂布过滤后再在灭菌研钵中研磨致细，然后用灭菌蒸馏水制成一定浓度的菌悬液，再用此菌悬液来接种。这是有经验的博士师兄告诉俺的！你可以试一试！
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17楼2011-05-12 23:24:51
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ufowinner

木虫 (小有名气)
摇瓶里面加一些玻璃珠试试。
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18楼2011-05-21 23:30:36
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刘文瑶

新虫 (小有名气)
黑曲霉在三角瓶这样长，算是正常吧。因为不清楚你的接种量、培养基配方等条件，这些影响菌丝球形态以及产物产量是很明显的哦，呵呵。多试试吧！
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19楼2011-06-27 13:23:01
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sustjeanis

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by shenmofeng at 2011-05-11 10:33:16:
现在的发酵时间已经是延长过的了，应该不是时间不够估计是菌体生长异常导致的

工厂的话药瓶一般就是3天，时间不宜太长。木薯也不需要去皮
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20楼2011-06-28 20:31:05
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