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HPLC测三萜时的诡异情况求助
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紧急求助,HPLC-UV,用的岛津,218nm,色谱柱:C18,4.6*250,流动相:乙腈:水=60:40,柱温:30度。测的物质是一个三萜苷元,标准品于15min左右出峰,两年内使用于测量样品含量正常稳定。 但最近突然一进针标准品即在2-3min即物质全出,反复排除了气泡和泵的问题,还换了三根不同的柱子(包括新柱子),和不同时期配制的标准品进行测试,都是同一情况,样品也同样不能测出。此外,室温用了空调保持恒定。总的来说,排除了标准品变质,温度,气泡,AB泵,C18柱的问题。 更诡异的是用同样设备同样柱子在测270多nm的其他物质时,一切正常,没有出现这种立即出峰的情况。附前后对比图,恳请大家帮助。 |
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