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【求助】三萜皂苷类HPLC样品前处理
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雨中漫步681
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【求助】三萜皂苷类HPLC样品前处理
欲分离出一种三萜皂苷类物质,弱酸性,在分离之前需做HPLC测原料中该种物质含量,请问虫友们,样品怎么进行前处理?除了选择流动相还得需要查哪方面的,以前没做过液相,有知道的虫友们帮帮忙,谢谢啦
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2010-12-20 09:50:40
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雨中漫步681(金币+1):谢谢,不知你能否对三萜皂苷类这种类型物质具体一下?呵呵 2010-12-21 09:10:31
雨中漫步681(金币+2): 2010-12-21 09:13:33
样品的前处理,基本有以下几种方法:萃取、沉淀、过柱等
液相需要查找的资料,主要有检测波长、流动相、柱子类型吧
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2010-12-20 22:06:40
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雨中漫步681(金币+1):谢谢,因为是中药,怕里面有些成分会堵塞柱子,所以除了过滤,用不用除一些其他杂质再进样? 2010-12-21 09:11:51
雨中漫步681(金币+2): 2010-12-21 09:13:26
检测波长、流动相、柱子类型、还有就是进样前要过滤
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3楼
2010-12-20 22:19:52
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langtong
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雨中漫步681(金币+2):谢谢,呵呵 2010-12-21 11:28:59
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2010-12-20 22:52:06
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雨中漫步681(金币+2):谢谢,有所领悟了,哈哈 2010-12-23 09:52:36
说个参考的思路:可以加有机溶剂,如甲醇提取,用石油醚或者氯仿等把脂溶性大的杂质除去,再加水饱和正丁醇萃取出总皂苷,如果还需继续纯化,可再试试过大孔树脂或硅胶柱
皂苷类普遍紫外吸收弱,如果想用紫外检测器的液相做,建议参考一下药典中含皂苷类药材选择的波长,如人参的含量测定选择了203nm
另外,推荐一本书《中药有效成分提取分离》,下载地址在下面
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1753497
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2010-12-22 10:04:00
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