应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何确定PCR试验的最优体系
51/1返回列表
查看: 1020  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hhb7610076

金虫 (正式写手)

[求助] 如何确定PCR试验的最优体系

做蚜虫的SSR-PCR，琼脂糖检测后只有引物二聚体，如何改进pcr体系呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
不能承受生命之轻！
1楼 2011-04-27 09:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liugs

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2011-04-28 08:42:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 是啊 2011-04-27 16:56:01
有了条带才去优化体系的，现在是没条带，先增加模板用量，降低退火温度，等有了条带再去优化。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-04-27 10:06:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ybQuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

hhb7610076(金币+2): 2011-05-06 10:32:19
原因：
1.引物特异性差
2.模板或引物浓度过高
3.酶量过多
4.Mg2+浓度偏高
5.退火温度偏低
6.循环次数过多
对策：
1.重新设计引物或者使用巢式PCR
2.适当降低模板或引物浓度
3.适当减少酶量
4.降低镁离子浓度
5.适当提高退火温度或使用二阶段温度法
6.减少循环次数
赞一下 回复此楼
哥在江湖漂，很少不挨刀，不是愿意挨，是哥很无奈!
4楼2011-04-29 09:39:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ybQuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

原因：
1.引物特异性差
2.模板或引物浓度过高
3.酶量过多
4.Mg2+浓度偏高
5.退火温度偏低
6.循环次数过多
对策：
1.重新设计引物或者使用巢式PCR
2.适当降低模板或引物浓度
3.适当减少酶量
4.降低镁离子浓度
5.适当提高退火温度或使用二阶段温度法
6.减少循环次数
ps：做一下引物浓度梯度、TM梯度等。
赞一下 回复此楼
哥在江湖漂，很少不挨刀，不是愿意挨，是哥很无奈!
5楼2011-04-29 09:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭