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sun1123moon

铜虫 (小有名气)

[求助] 酯酶同工酶

想请教一下,酯酶同工酶染色用什么方法效果比较好呢?
是用固兰盐还是考马斯亮兰?
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焚琴煲鹤

铜虫 (初入文坛)

我的配方是:100mg 的α-乙酸萘酯,100mg的β-乙酸萘酯,先用丙酮溶解再加200mg的固牢蓝盐,然后加入0.1M(pH 6.4)的PBS缓冲液,定容到200ml,然后出现很多絮状物,过滤,得到有点微微粉红的液体,可室温35度染了大半个小时一点谱带都没出来,求解?染其他同工酶还好,但酯酶染不出来。。
朝游岳鄂暮苍梧,袖里青蛇胆气粗
6楼2014-01-24 13:20:08
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励 2011-04-21 23:14:22
你说的都是专一性不高的染色方法

第8 章 同工酶分析技术
http://www.brim.ac.cn/book/book220_386.pdf
或许对你有帮助
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-04-21 22:37:47
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

你说的考马斯亮蓝是专一性不高的染色方法


第8 章 同工酶分析技术
http://www.brim.ac.cn/book/book220_386.pdf
或许对你有帮助

下面的对话是摘自dingxiangyuan(会被小木虫屏蔽的)
问:我在做烟草叶片酯酶同工酶染色时候发现整个泳道全被染上颜色,分辨不出条带来。用的染色液是 50mg 醋酸-1- 萘酯,50 mg 醋酸-2- 萘酯,100mg 固兰RR盐,溶解于 3ml 丙酮,再加入 150 ml 的 ph 6.5 的 磷酸缓冲液。请问怎么回出现这种情况?

答:我个人认为你的问题出在染色液上,我的配方是:100mg 的α-乙酸萘酯,100mg的β-乙酸萘酯,200mg的固牢蓝盐,先用丙酮溶解,然后加入0.1M(pH 7.0)的PBS缓冲液,定容到100ml。这样应该效果不错!
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3楼2011-04-21 22:40:27
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 很热心! 2011-04-21 23:13:27
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-04-21 22:40:27:
你说的考马斯亮蓝是专一性不高的染色方法


第8 章 同工酶分析技术
http://www.brim.ac.cn/book/book220_386.pdf
或许对你有帮助

下面的对话是摘自dingxiangyuan(会被小木虫屏蔽的)
问:我 ...

你说的考马斯亮蓝是专一性不高的染色方法


第8 章 同工酶分析技术
http://www.brim.ac.cn/book/book220_386.pdf
或许对你有帮助

下面的对话是摘自dingxiangyuan(会被小木虫屏蔽的)
问:我在做烟草叶片酯酶同工酶染色时候发现整个泳道全被染上颜色,分辨不出条带来。用的染色液是 50mg 醋酸-1- 萘酯,50 mg 醋酸-2- 萘酯,100mg 固兰RR盐,溶解于 3ml 丙酮,再加入 150 ml 的 ph 6.5 的 磷酸缓冲液。请问怎么回出现这种情况?

答:我个人认为你的问题出在染色液上,我的配方是:100mg 的α-乙酸萘酯,100mg的β-乙酸萘酯,200mg的固牢蓝盐,先用丙酮溶解,然后加入0.1M(pH 7.0)的PBS缓冲液,定容到100ml。这样应该效果不错!

再送上几篇中文文章作参考
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4楼2011-04-21 23:03:38
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