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化工人2010木虫 (小有名气)
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[求助]
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳求助
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的电压、电流与跑电泳时间怎么确定啊， 恒压 还是恒流 浓缩胶和分离胶浓度由什么决定啊 我做的是羊毛的溶解，附件是我的羊毛蛋白的电泳图 条件：分离胶15%, 浓缩胶5%, 垂直平板电泳, 加样量为7μL。电极缓冲液为Tris-HCl( pH 8.3)系统。电流40mA，浓缩胶电压100v，分离胶电压150v。 条带很模糊，这是什么原因啊 。是不是羊毛的溶解 分子量较杂 还是因为蛋白溶液不纯的原因呢？ 我不想测很精确 只想知道一个大概的范围 你看我们的谱图 是不是只要染上色的地方 就能说是有那个范围的蛋白吗 就是4.1KD-66KD的蛋白都有吗 我们现在又买了一个14.4KD-96KD的marker 不过还是那样 很模糊，整个柱都有颜色 郁闷！ 哪位做过凝胶电泳的虫友给指点一下 啊 不胜感激！  |
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5楼2011-06-26 17:07:53