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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 线性化及完整的质粒电泳问题。
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+2): 知错能改 善莫大焉 2011-04-20 11:22:55
引用回帖:
Originally posted by xuguanghai at 2011-04-20 11:06:52:
恩，谢谢，去看看

我刚才去请教实验室诸位高手，大家一致认为开环跑的最慢，其实是线性，最快的是超螺旋，哎。。。学艺不精啊。。。。不好意思啊。见谅！

我说的那本书上面有提到，可能我把意思没有搞清楚。。。。
再次不好意思！
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
11楼2011-04-20 11:13:31
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好！

优秀版主优秀版主
晕死，楼主什么情况啊。。

看看天使托给你的解释。
是超螺旋最快啦~

看下基本知识咯~
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最好的年龄是，那一天，终于知道并且坚信自己有多好，不是虚张，不是夸浮，不是众人捧，是内心明明澈澈知道：是的，我就是这么好。
12楼2011-04-20 13:49:25
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好！

优秀版主优秀版主
★ ★
dhd997(金币+2): 欢迎经验交流 2011-04-22 09:13:33
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-04-20 11:13:31:
我刚才去请教实验室诸位高手，大家一致认为开环跑的最慢，其实是线性，最快的是超螺旋，哎。。。学艺不精啊。。。。不好意思啊。见谅！

我说的那本书上面有提到，可能我把意思没有搞清楚。。。。
再次不好 ...

呵呵，知错能改，就有进步呀！

超螺旋比较紧蹙，阻力小多了。是最快的。

这也是为什么我们跑质粒电泳，好的会发现三条带的原因啦~
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最好的年龄是，那一天，终于知道并且坚信自己有多好，不是虚张，不是夸浮，不是众人捧，是内心明明澈澈知道：是的，我就是这么好。
13楼2011-04-20 13:51:04
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
呵呵，王镜岩的《生物化学》里是说：超螺旋》线性》开环。超螺旋跑最快滴。考研也考得很多。
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14楼2011-04-20 15:33:32
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+3): 鼓励！有些时候确实是不一样的。 2011-04-21 23:35:21
嗯~~应该是超螺旋跑的最快，线性化的质粒一般显示为表观分子量，所以理论上跑的最慢，但有一些情况下会出现开环的质粒要比线性化的跑的慢，但一般情况为电泳速度：超螺旋》开环》线性
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15楼2011-04-20 22:08:29
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111602

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by beibei9535 at 2011-04-20 13:49:25:
晕死，楼主什么情况啊。。

看看天使托给你的解释。
是超螺旋最快啦~

看下基本知识咯~

请看更新！谢谢交流！
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16楼2011-04-21 01:44:14
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111602

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-04-20 11:13:31:
我刚才去请教实验室诸位高手，大家一致认为开环跑的最慢，其实是线性，最快的是超螺旋，哎。。。学艺不精啊。。。。不好意思啊。见谅！

我说的那本书上面有提到，可能我把意思没有搞清楚。。。。
再次不好 ...

谢谢交流！请看看我更新的内容
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17楼2011-04-21 01:45:21
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, EPI+1): 太牛了！实践是检验真理的唯一标准哦！话说区长MM睡这么晚会长痘痘滴…… 2011-04-21 23:38:07
这个可不一定，也不要在什么情况下都说超螺旋跑的快，首先要搞清楚它为什么会跑的快，他有他的决定因素。并不是在任何情况下都是这样的。我们不是在比拼理论知识，而是为了解决我们试验中确实存在问题，我做过类似的
线性跑的比超螺旋要快
建议楼主换个0.7-0.8%胶跑一下看看（浓度一定要准哦），电压不用太高，看看结果如何，然后我们再来讨论
曾经看过一个解释：胶浓度小，则孔径大，超螺旋的跑的阻力小，就快些。而胶浓度大，则孔径小，超螺旋的跑的阻力大，就慢些。而线性片段的快慢与分子量有关，不受浓度的影响。 超螺旋的速度是可以变化的，与胶浓度有关，与分子量无关。
超螺旋的速度还和凝胶中的EB有关系（如果你没加的，那就算了）

我的一个实验图片，哪个是酶切的，哪个是质粒对照楼主应该能看出来
胶的浓度大于1%


[ Last edited by xiaoweiwei121 on 2011-4-21 at 03:27 ]
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18楼2011-04-21 03:04:06
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111602

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaoweiwei121 at 2011-04-21 03:04:06:
这个可不一定，也不要在什么情况下都说超螺旋跑的快，首先要搞清楚它为什么会跑的快，他有他的决定因素。并不是在任何情况下都是这样的。我们不是在比拼理论知识，而是为了解决我们试验中确实存在问题，我做过类似 ...

非常感谢你的意见和建议，非常宝贵的经验啊。可以看出有明确的一条带的那个样品是线性化的，而完整的质粒会出现几条带。我会试试你的建议跑电泳。再次感谢，也欢迎其他朋友来交流心得！
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19楼2011-04-21 08:29:57
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主
引用回帖:
Originally posted by 111602 at 2011-04-21 08:29:57:
非常感谢你的意见和建议，非常宝贵的经验啊。可以看出有明确的一条带的那个样品是线性化的，而完整的质粒会出现几条带。我会试试你的建议跑电泳。再次感谢，也欢迎其他朋友来交流心得！

等待你的结果
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20楼2011-04-21 21:49:40
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