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111602木虫 (著名写手)
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[交流]
线性化及完整的质粒电泳问题。 已有8人参与
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最近在做实验过程中，遇到要将质粒先线性化，发现用酶切后电泳，与未酶切的质粒相比，跑的速度要快，不知是何原因，这些质粒都非空载，有些不理解，一般线性后跑的速度应该比超螺旋快才对啊。请高手指教！ 首先感谢各位的讨论和建议。但必须说明一点，这个质粒是重组的，而且选择的酶只有一个酶切位点，电泳用的是1% AGAROSE GEL. 120V 30MIN.并且可以肯定已经被线性化的了。因为后继实验如果没有被线性化是无法成功的。 大家的回答都是建立在理论分析基础上的。我也赞同这一理论，但不知道有没有真正做过这一实验的朋友，可能我的实验（电泳）出了问题，但希望有实践经验的朋友给点意见。 [ Last edited by 111602 on 2011-4-21 at 01:42 ] |
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elvias
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15楼2011-04-20 22:08:29