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飘纯

铜虫 (初入文坛)

[求助] 毛细管电泳 水溶性药物检测不到峰

详细内容如下:
药物水溶性很强,有4~5个PKa,覆盖整个PH范围。
血浆样品(羊血)
1. 按血浆:甲醇=1:3除蛋白后,上清吹干,用缓冲盐复溶后,进样分析。检测不到主峰
2.按血浆:乙腈=1:1.5除蛋白后,上清吹干,用缓冲盐复溶后,进样分析。检测不到主峰
3。 按血浆:三氯乙酸(10%)=1:0.9 除蛋白后,上清吹干,用缓冲盐复溶后,进样分析。检测不到主峰
无论电进样还是重力进样
缓冲盐是:磷酸二氢钾-柠檬酸ph6.0
最近尝试了很多种方法,一直检测不到主峰。快疯了,求好心人帮忙!到底问题出在哪里?
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xiongba

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是你的药物不稳定,分解了啊?~~~
2楼2011-04-19 11:19:29
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飘纯

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by xiongba at 2011-04-19 11:19:29:
是不是你的药物不稳定,分解了啊?~~~

稳定性我也测过了,稳定性很好!
3楼2011-04-19 12:52:37
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xiongba

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是你的药物和蛋白结合啊?~~药物的体内过程你清楚吗?~~~
4楼2011-04-19 12:57:19
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飘纯

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by xiongba at 2011-04-19 12:57:19:
是不是你的药物和蛋白结合啊?~~药物的体内过程你清楚吗?~~~

蛋白结合率为22%。就算结合的话,除蛋白之后应该可以释放出来一部分药物吧!
不太清楚。。很着急,但是就是找不到问题所在
5楼2011-04-19 13:11:20
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xiongba

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

额……那你检测的结果是什么啊?难道是什么都没有吗?~也有可能在体内代谢的比较快什么的啊?~……
6楼2011-04-19 13:41:45
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xiongba

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

飘纯(金币+1): 热心给力 2011-04-19 15:24:51
引用回帖:
Originally posted by 飘纯 at 2011-04-19 13:11:20:
蛋白结合率为22%。就算结合的话,除蛋白之后应该可以释放出来一部分药物吧!
不太清楚。。很着急,但是就是找不到问题所在

额……那你检测的结果是什么啊?难道是什么都没有吗?~也有可能在体内代谢的比较快什么的啊?~……
7楼2011-04-19 13:42:37
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飘纯

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by xiongba at 2011-04-19 13:42:37:
额……那你检测的结果是什么啊?难道是什么都没有吗?~也有可能在体内代谢的比较快什么的啊?~……

我附上图给你看看吧!
用三氯乙酸除蛋白的
1.空白

2.样品



8楼2011-04-19 13:55:28
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xiongba

铁虫 (小有名气)

这个我也没看出什么来,也没做过毛细管电泳,建议你做一个对照试试,我怀疑是你的方法有问题……
9楼2011-04-19 14:11:31
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飘纯

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by xiongba at 2011-04-19 14:11:31:
这个我也没看出什么来,也没做过毛细管电泳,建议你做一个对照试试,我怀疑是你的方法有问题……

哦。。那谢谢你了!
估计是方法有问题吧,目前自己还找不到问题所在!
参考下文献做一遍试试了
10楼2011-04-19 14:40:39
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