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zwj0420

铜虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】怎么鉴别植物细胞是活着还是死了，有任何想法的都请不吝指教，谢谢

我这边需要鉴定木头是否经过了80度以上的热处理。我想处理后植物细胞肯定死了，所以想通过鉴定植物细胞是活着还是死了的方法来判定是否经过了6小时80度的热处理。我们知道活着的细胞有渗透压，死后就没了，可不可以把部分木头浸泡在某种颜色的溶液中，通过显微镜来观察细胞内是否有颜色来判定。
1 如果可以，请教一下一般用哪种溶液，本人不是很懂这方面的请指教。
2 如果不可以，还有什么办法。
3 如果您有什么好办法都可以说说，再次先说声谢谢了。

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1楼2011-04-14 14:54:07

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chinatang

铜虫 (初入文坛)

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用活体染色技术鉴定植物细胞死活的方法

★ ★ ★ ★
zwj0420(金币+1):谢谢参与
咸鱼(金币+3): 感谢认真回帖交流~ 2011-04-14 20:46:01
zwj0420(金币+5): 感谢回复，非常用心，虽然说的不是带有纤维壁的细胞但是也有很好的参考借鉴意义，非常感谢 2011-04-14 21:56:18

活体染色是利用某种对植物无害的染料稀溶液进行活细胞染色的技术。中性红是常用的活体染料之一，它是一种碱性染料，也是一种弱碱性PH指示剂，变色范围在PH6.8—8.0之间（由红变黄）。在中性或微碱性环境中，植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡内排泌。由于液泡通常呈酸性反应，因此进入液泡的中性红呈现樱桃红色，
在这种情况下，原生质和细胞壁一般不着色。死细胞由于膜的选择透性消失，液泡破坏，因此不产生液泡着色现象。但中性红的阳离子却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合，使原生质和细胞核染色。本实验需要如下材料和用具：洋葱鳞茎、小麦叶片或紫鸭跖草叶片、刀片、尖头镊子、载玻片、盖玻片、显微镜、0.03％中性红溶液、1M硝酸钾溶液、酒精灯。实验步骤：
1.削取较幼嫩的洋葱鳞片，在内表面切割5平方毫米左右的方形切痕，用尖镊子撕下这块内表皮，投入0.03％的中性红溶液中。如用小麦叶片，表皮不易撕取，可把叶片平放载玻片上，加水蘸湿，用刀片轻轻刮去上表皮、叶肉和叶脉，只留下一层下表皮，再切割成5平方毫米的小片。
2.染色10－15分钟后取出，用蒸馏水稍加冲洗，在低倍镜下观察，此时主要是细胞壁染色，原生质和液泡不着色。
3.将制片放在自来水（PH略高于7.0）中浸泡10－15分钟，再进行显微观察，此时细胞壁完且脱色，液泡染成均匀的樱桃红色，细胞核和原生质不着色。
4.将染好的表皮浸入1M的硝酸钾溶液中，约10分钟后取出观察。由于钾离子能使原生质膨胀，发生帽状质壁分离，因此能清楚地看到无色透明的原生质和染为红色的液泡。
5.将表皮组织加热或酒精浸泡，杀死细胞后再染色，则可看到死细胞的细胞质及细胞核都染上颜色，而看不到活细胞具有的液泡染色现象。
如将步骤3中的活染制片在酒精灯火焰上微微加热，以杀死细胞，也可看到原生质呈不均匀的凝胶状，与细胞核一起被染成红色。另外，在活染制片中仔细寻找，也可能看到个别死细胞，经中性红染色后其细胞核清晰可辨。