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整体柱

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[交流] 【求助/交流】提细胞蛋白怎么也提不好

各位大虾们   请教下   我提细胞蛋白每次提出来浓度都没超过2MG/ML   我是加入200ULripa 在六孔板各孔中  用细胞刮刮下细胞  吹打  然后离心12000RPM 30min  
不知这个步骤哪里有欠缺呢
   本实验室没有超声仪  所以不能加用超声使细胞裂解   不知还有更好方法吗  
我做western blot需要蛋白浓度3.5mg/ml左右
在加裂解液之前  用PBS洗细胞这些步骤需要在超净台上进行吗   
感谢

[ Last edited by 整体柱 on 2011-4-1 at 13:03 ]
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