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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】关于HPLC的问题
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taiyang0209

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于HPLC的问题 已有15人参与

最近做了个植物的分离，萃取后测了活性，决定开始分EM (EtOAc:MeOH=5：1）层， 教授要先上下HPLC简单看下峰。 可是上HPLC的时候出问题了，大约在六分钟左右出现了峰，这个峰很大，当然肯定是混合物，可是为什么六分钟后就再也没有峰了呢。为了调保留时间，ACN:Water=2：98  这样峰还是出的很快，而且后面就没有峰了。不明白怎么回事了，麻烦大家帮帮忙。用的是分析柱，柱子也换过。在点反相TLC板的时候，展开剂用的ACN：Water=2:8和9:1  在TLC板上，样品是有一定分离的，Rf 0.2以下都有东西的。可是一上柱子咋就一下都下来了呢。。实在是想不明白了，希望大家帮助一下，谢谢
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1楼 2011-03-27 10:31:38
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luojin7653

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
大概是什么物质 检测波长多少？流动相条件多少
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今晚打老虎
2楼2011-03-27 11:49:57
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taiyang0209

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by luojin7653 at 2011-03-27 11:49:57:
大概是什么物质 检测波长多少？流动相条件多少

里面是什么物质， 这个的确不知道。 检测波长254和365都用了。流动相条件ACN：Water  比例2：98、 5：95、10：90、20：80、90：10 都试过了，结果都是很快就出峰了，然后后面就没有峰了。纠结ING
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3楼2011-03-27 14:24:33
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luojin7653

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要不换甲醇流动相试试 一般甲醇的洗脱能力较小点
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今晚打老虎
4楼2011-03-27 14:27:36
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taiyang0209

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by luojin7653 at 2011-03-27 14:27:36:
要不换甲醇流动相试试 一般甲醇的洗脱能力较小点

甲醇也试过了。结果一样，现在实在不知道咋办了呀。。。愁死了。。
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5楼2011-03-27 14:38:32
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luojin7653

银虫 (正式写手)
6楼2011-03-27 14:46:38
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hyyyzyq

银虫 (小有名气)
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jiangchunyong(金币+1): 多谢指点！ 2011-03-27 15:43:54
进样阀不干净 六分钟出的峰应该进样阀以前残留的东西 好好洗洗吧 洗的时候不要接柱子
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7楼2011-03-27 15:36:33
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by hyyyzyq at 2011-03-27 15:36:33:
进样阀不干净 六分钟出的峰应该进样阀以前残留的东西 好好洗洗吧 洗的时候不要接柱子

恩 这个想法一样 LZ还是先把机子洗洗再说 有可能的话 检测池也洗一下
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8楼2011-03-27 17:47:10
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taiyang0209

银虫 (小有名气)
恩，谢谢大家的帮忙，我洗洗看看
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9楼2011-03-27 17:51:51
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xkp123

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
样品的极性比较大，考虑用正相看看
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10楼2011-03-27 20:19:50
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