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taiyang0209

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于HPLC的问题 已有15人参与

最近做了个植物的分离,萃取后测了活性,决定开始分EM (EtOAc:MeOH=5:1)层, 教授要先上下HPLC简单看下峰。 可是上HPLC的时候出问题了,大约在六分钟左右出现了峰,这个峰很大,当然肯定是混合物,可是为什么六分钟后就再也没有峰了呢。为了调保留时间,ACN:Water=2:98  这样峰还是出的很快,而且后面就没有峰了。不明白怎么回事了,麻烦大家帮帮忙。用的是分析柱,柱子也换过。在点反相TLC板的时候,展开剂用的ACN:Water=2:8和9:1  在TLC板上,样品是有一定分离的,Rf 0.2以下都有东西的。可是一上柱子咋就一下都下来了呢。。实在是想不明白了,希望大家帮助一下,谢谢
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xkp123

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
样品的极性比较大,考虑用正相看看
10楼2011-03-27 20:19:50
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luojin7653

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
大概是什么物质 检测波长多少?流动相条件多少
今晚打老虎
2楼2011-03-27 11:49:57
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taiyang0209

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by luojin7653 at 2011-03-27 11:49:57:
大概是什么物质 检测波长多少?流动相条件多少

里面是什么物质, 这个的确不知道。 检测波长254和365都用了。流动相条件ACN:Water  比例2:98、 5:95、10:90、20:80、90:10 都试过了,结果都是很快就出峰了,然后后面就没有峰了。纠结ING
3楼2011-03-27 14:24:33
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luojin7653

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要不换甲醇流动相试试 一般甲醇的洗脱能力较小点
今晚打老虎
4楼2011-03-27 14:27:36
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