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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】发酵液除蛋白方法
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lhj_890

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】发酵液除蛋白方法

做酵母菌培养，用HPLC测定其发酵液中的代谢产物的量，需要预处理将发酵液中的蛋白除去，想问问大家都是怎样处理的？注：发酵液中有酵母膏，蛋白胨
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1楼2011-03-23 08:40:25
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propanediol

银虫 (正式写手)
lhj_890(金币+1): 2011-03-29 07:55:10
lhj_890(金币+1): 2011-04-25 16:54:25
做液相色谱的话对蛋白没有特别要求，

一般检测发酵液中的代谢产物含量，采用如下处理方式：
1 离心取出具体和大分子 8000-15000 rpm
2 （可选）0.45u的膜过滤

HPLC柱子能够耐受上述处理后的蛋白含量
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6楼2011-03-29 07:29:43
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wallacelzh

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
lhj_890(金币+1): 2011-03-23 13:40:10
scelab(金币+5): 谢谢交流 2011-03-23 15:32:31
如果要测定的代谢产物是小分子物质，可以用透析的方法；

如果要测定的代谢产物是非蛋白质的大分子物质，可以使用选择性的蛋白质沉淀剂，也可以用层析；

如果要测定的代谢产物是蛋白质，建议浓缩后用电泳或层析进行分离。
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2楼2011-03-23 09:35:31
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lhj_890

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wallacelzh at 2011-03-23 09:35:31:
如果要测定的代谢产物是小分子物质，可以用透析的方法；

如果要测定的代谢产物是非蛋白质的大分子物质，可以使用选择性的蛋白质沉淀剂，也可以用层析；

如果要测定的代谢产物是蛋白质，建议浓缩后用电泳或层 ...

测定的是小分子物质，但是需要用液相测定，透析方法是不是有些慢呢？
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3楼2011-03-23 13:41:53
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yyw30000

铜虫 (小有名气)
lhj_890(金币+1): 2011-04-25 16:55:24
如果透析方法可行就要用，不要贪快而目的达不到
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4楼2011-03-23 17:46:00
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