| 查看: 2092 | 回复: 10 | |||
[交流]
【求助/交流】发酵液除蛋白方法
|
|||
| 做酵母菌培养，用HPLC测定其发酵液中的代谢产物的量，需要预处理将发酵液中的蛋白除去，想问问大家都是怎样处理的？注：发酵液中有酵母膏，蛋白胨 |
回复此楼» 猜你喜欢
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有4人回复
-
2026年叶企孙基金
已经有6人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有18人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有13人回复
-
基金系统什么内容也没有
已经有9人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有11人回复
-
怎么查啊
已经有6人回复
-
哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识
已经有6人回复
-
面上合作单位盖章
已经有5人回复
-
导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白纯化遇到问题
已经有22人回复
- 得到了一种单体，发现只溶于氢氧化钠溶液，用什么方法可以得到单体，除杂是否可行？
已经有10人回复
- 发酵液中蛋白质的提取
已经有11人回复
- 微生物胞内物质与胞外代谢产物提取
已经有20人回复
- 发酵液中酚类物质提取和分离
已经有9人回复
- 【求助】急！急！急！有难度的问题，求助茶水发酵液前处理
已经有8人回复
- 【求助/交流】真菌蛋白提取
已经有5人回复
7楼2011-03-29 07:54:56
2楼2011-03-23 09:35:31
3楼2011-03-23 13:41:53
4楼2011-03-23 17:46:00
5楼2011-03-28 20:44:09
6楼2011-03-29 07:29:43
8楼2011-03-29 12:18:49
9楼2011-03-29 15:17:28
10楼2014-07-12 00:34:50
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
| 一。蛋白质沉淀方法1.中性盐盐析法⑴在一定的 pH值及温度条件下，改变盐的浓度（即离子强度）达到沉淀的目的，称为“Ks”分级盐析法。（Ks盐析：固定pH, 温度，改变盐浓度）⑵在一定的离子强度下，改变溶液的pH值及温度，达到沉淀的目的，称为“β”分级盐析法。（β盐析：固定离子强度，改变pH及温度。）2.等电点沉淀法蛋白质等电点沉淀法是基于不同蛋白质离子具有不同等电点这一特性，依次改变溶液pH值的办法，将杂蛋白沉淀除去，最后获得目标产物。3.有机溶剂沉淀法许多能与水互溶的有机溶剂如乙醇、丙酮、甲醇和乙腈，常用于低盐浓度下沉淀蛋白质。4.非离子型聚合物沉淀法20世纪60年代非离子型聚合物开始用于分离血纤维蛋白原和免疫球蛋白，从此高相对分子质量非离子聚合物沉淀蛋白质的方法被广泛使用，如：聚乙二醇（PEG）、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、葡聚糖等。5.金属沉淀法 能与羧基、胺基等含氮化合物以及含氮杂环化合物强烈结合的金属离子，如：Mn2+、Fe2+、Co2+、Ni2+、Cu2+、Zn2+、Cd2+； 能与羧酸结合而不与含氮化合物结合的金属离子，如：Ca2+、Ba2+、Mg2+、Pb2+； 与巯基化合物强烈结合的金属离子，如：Hg2+、Ag+、Pb2+。 实际使用时，金属离子的浓度常为0.02 mol/L。6.亲和沉淀初始阶段：将一个目标蛋白质与键合在可溶性载体上的亲和配体络合成沉淀；所得沉淀物用一生中适当的缓冲溶液进行洗涤，洗去可能存在的杂质；用一种适当的试剂将目标蛋白质从配体中离解出来。7.选择性变性沉淀法（1）例如对于α-淀粉酶等热稳定性好的酶，可以通过加热进行热处理，使大多数杂蛋白受热变性沉淀而被除去。（2）根据欲分离物质所含杂质的特性，通过改变pH值或加进某些金属离子等使杂蛋白变性沉淀而被除去。8.反胶束萃取蛋白质菌体细胞提取固液分离是生物产品生产中的重要单元操作。培养基、发酵液、某些中间产品和半成品等都需进行固液分离。发酵液由于种类多、粘度大及成分复杂，其固液分离最为困难。固液分离的方法很多，生物工业中常规的方法有分离筛、重力沉降、浮选分离、离心分离和过滤等，其中用于发酵液固液分离的方法主要是离心分离和过滤。二。超滤膜滤去。 |
11楼2014-07-16 13:56:45
30