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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】求教蛋白酶的分离纯化中遇到的问题
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lonelyaries

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求教蛋白酶的分离纯化中遇到的问题

在蛋白酶分离纯化过程中，经粗酶液（发酵液离心上清）-硫酸铵沉淀-透析除盐的过程，硫酸铵沉淀后总酶活力损失40%,可是透析除盐后，测定总酶活力又显著上升，是粗酶液中测定的总酶活力的80%多，请问这种情况可能存在吗？为什么？
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1楼2011-03-22 09:09:40
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525xielimeng

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
合理，硫酸铵沉淀过程中有很多的因素导致酶活降低，蛋白质的临时变性，主要是由于局部浓度过高或者搅拌激烈
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6楼2013-10-14 15:50:48
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ls2046

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 欢迎常来 2011-03-22 13:43:43
只要自己重复做了，而且没有错误，那么结果就是结果，就是可能存在的。剩下的就是为什么了，本人觉得可能是高浓度的硫酸铵对该酶的性质或对酶测定产生了影响。
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2楼2011-03-22 10:57:33
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贺兰10

银虫 (小有名气)
★
lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-03-22 13:44:03
嗯，同意楼上说法，有时候盐的存在会影响酶活性。正常。
沉淀后酶活力降低也正常。
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3楼2011-03-22 13:28:30
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yaojc

木虫 (正式写手)
蛋白质的活性受多种因素影响，高盐可能导致酶三级结果变化，活性下降，除盐后结构回复，活性自然就升高了。
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4楼2011-03-22 16:48:50
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